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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 一直都能PCR出来的产物，怎么重复不出来了
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囧囧俏

铁虫 (小有名气)

[求助] 一直都能PCR出来的产物，怎么重复不出来了

原来一直能P出来的产物，怎么也扩不出来了，到底是什么原因，buffer dntp 这些都没问题啊，体系也没变，到底是什么原因？
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1楼 2013-03-04 11:45:46
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囧囧俏

铁虫 (小有名气)
囧囧俏: 回帖置顶 2013-03-13 11:35:42
怎么没人回复呢？更棘手的问题来了 现在pcr阳性，但酶切总是阴性结果，阴阳对照成立，鉴定的是TA克隆的单克。做了半年了总是有各种问题，快要做死在酶切连接上了，求大神给点建议！！
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9楼2013-03-11 09:28:50
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qiuhengtong

新虫 (初入文坛)
模板或PCR仪的问题，多加点模板再做一个温度梯度PCR，应该能出来的吧。
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2楼2013-03-04 12:25:25
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yesali

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看看是不是管子和枪头的问题
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3楼2013-03-04 13:06:36
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2013-03-04 13:34:01
一般是模板的问题。基因组DNA这类大分子经多次冻融后质量会变差很多。一般适当多加一些模板应该可以P出来的。
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4楼2013-03-04 13:19:50
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