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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切后没条带了
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zkyysmzl2lwj

金虫 (正式写手)

[求助] 酶切后没条带了

本人做的是SNP，某次做酶切发现没条带了，但是pcr跑胶很好，之后又帮师兄作了几个，之前的能做出来，但是现在做也发现只要酶切就没条带了，求救！！
谢谢！
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1楼 2013-01-15 10:29:09
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用你的酶切体系试试切一个质粒看，很可能是酶或者酶切缓冲液被污染了。
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4楼2013-01-15 11:47:09
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yesali

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酶换一下新的，感觉是酶被污染了
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2楼2013-01-15 10:36:29
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冰风颤木

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得原因可能如下：
1、你昨晚PCR后 切胶回收 回收效率怎么样？回收后跑下电泳看看是不是条带很清晰或者很淡？
2、做酶切反应的时候 每个组份的量是不是合适？
祝你实验顺利！
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船到桥头自然直
3楼2013-01-15 10:41:32
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lizanzan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也遇到这种情况，减少酶切反应时间后情况好转，你可以试试
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5楼2013-01-15 15:01:45
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