| 查看: 2412 | 回复: 11 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
蛋白的表达量低不稳定怎么办
|
||
|
我在做肌红蛋白的原核表达，但是表达水平很低，但活性还可以。本来带有His标签，但是挂不上柱，用SP柱可以除去部分杂蛋白，但是透析的时候蛋白就会沉淀下来，离心后上清活性也是可以的，继续做稳定性时发现在4℃的稳定性很差，3周就降解的差不多没有了，但-20℃没问题是稳定的。 现在请假大家： 1.如何提高表达量，我是从温度、时间、IPTG浓度都试过了 2.如何提高稳定性，我的Buffer是20/25mM Tris pH7.5 1mM EDTA、0.02%叠氮钠 0.01%SDS 因为蛋白再透析时就产生沉淀，但上清仍有活性，我改变过他们的pH 和含氯化钠的量，最高加到100mM，但是透析还是有沉淀 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有146人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白表达不出来是怎么回事？
已经有12人回复
- 原核表达蛋白分子量大小
已经有13人回复
- 大肠杆菌BL21菌株表达目的蛋白时，菌液破碎前后的浑浊程度变化很不明显
已经有5人回复
- 表达蛋白折叠不正确会有活性麽？
已经有15人回复
- 蛋白表达量的提高
已经有24人回复
- 原核表达中目的蛋白不明确
已经有7人回复
- 蛋白表达不明确，但是连菌体蛋白都不见
已经有9人回复
- 融合蛋白在不同细胞系表达
已经有4人回复
- 原核表达蛋白诱导不出来
已经有16人回复
- 怎么提高诱导表达的目的蛋白含量
已经有14人回复
- 蛋白表达量少 怎么办
已经有11人回复
- 【求助/交流】请问有什么方法分析蛋白表达量吗
已经有4人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母表达胞外蛋白，sds电泳后看不到条带
已经有7人回复
- 【求助/交流】如何测定某一蛋白在不同组织的表达量？
已经有4人回复
- 【求助/交流】酵母表达外源蛋白，His-tag降解怎么办
已经有5人回复
- 【求助/交流】提高表达蛋白含量
已经有10人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白分子量偏大
已经有17人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌中蛋白表达量偏低，大家有什么建议？
已经有28人回复
- 【求助/交流】如何提高PET表达系统的蛋白表达量
已经有22人回复
- 【求助/交流】蛋白表达不稳定
已经有7人回复
- 【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带
已经有41人回复
3楼2013-01-06 16:34:02
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2013-01-06 15:10:34
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
4楼2013-01-07 02:39:49
5楼2013-01-10 13:44:42
50