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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白表达不稳定
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小白3521

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蛋白表达不稳定 已有6人参与

很奇怪，我的蛋白诱导表达很不稳定，同样的条件，有时候表达了，有时候又不表达，这是什么原因呢，有没有高手知道啊
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1楼 2010-07-28 16:24:33
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黄大牛
amisking:严禁纯表情发帖，已经是第二次警告了！ 2010-07-28 20:14:33
1949stone:纯表情 还抢沙发 不厚道啊 下次不要了啊 2010-07-28 20:24:45
2楼2010-07-28 18:32:56
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小白3521

金虫 (小有名气)
amisking:严禁纯表情发帖。 2010-07-28 20:14:43
1949stone:自己的纯表情板凳？？？why 2010-07-28 20:25:10
3楼2010-07-28 19:24:30
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bunny0512

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):欢迎交流 2010-07-28 20:14:52
同样条件肯定不会有太大误差的，只能默认楼主有某些地方没太注意了。。换新鲜的培养基重来一遍。。。
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在哪里~在哪里见过你~
4楼2010-07-28 19:58:01
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小白3521

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by bunny0512 at 2010-07-28 19:58:01:
同样条件肯定不会有太大误差的，只能默认楼主有某些地方没太注意了。。换新鲜的培养基重来一遍。。。

重来N遍了，我做的另外一个蛋白就表达的挺好，次次都有，就是这个，奇了怪了
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5楼2010-07-28 20:13:12
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-07-29 10:04:56
这个东西很正常，昨天可以做出来的东西，今天什么条件都没有变，可以没有做出来，正常情况，表面上是觉得条件，加的量什么都没有变，实际上都是在变的！
我的建议：重复，如果没有结果；适当变换条件，再试！
坚持！加油！
赞一下(3人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
6楼2010-07-28 23:15:01
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jasco

木虫 (正式写手)
1 仔细想想有没有什么变化：诱导时菌液浓度一致么？诱导剂换过没？摇床是同一台么？温度？转速？。。。
2 菌株是不是不稳定，重新筛一个强壮的菌株？
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7楼2010-07-29 11:16:13
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我的经验是菌种放在-80冻一次表达量就会下降，重新转化的表达量就很高。

我现在的做法是从转化后挑一个单菌落培养，然后菌液画线培养，下次从画线的平板上调取单菌落。
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8楼2010-07-29 12:23:22
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