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嘉笛

木虫 (小有名气)


[求助] 大肠杆菌高密度发酵异常现象求解

最近做大肠杆菌高密度发酵,BL21宿主菌,PET载体,种子摇过夜OD600可达3.0左右,10%接种量转入含有4LTB的发酵罐中,前5个小时菌密度基本不增加,后期菌密度增加但是检测不到目的蛋白表达,所收菌体中也没有质粒。连续两次都是这种情况,请虫友们告知真相,不胜感激
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kedaxiaoyu

木虫 (职业作家)

神虫浮云

染菌或菌种未表达……
2楼2012-05-18 14:57:22
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hkfgwww

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
后期是几个小时,加上生长曲线图看看,我也做这个
微生物发酵
3楼2012-05-18 19:35:31
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wadecao

禁虫 (正式写手)


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 欢迎来微生物板块交流 2012-05-19 08:57:18
本帖内容被屏蔽

4楼2012-05-19 07:16:19
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KO奋斗

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
肯定是质粒丢失了,稳定性有问题,建议你重新重组下吧
5楼2012-05-20 11:08:43
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嘉笛

木虫 (小有名气)


引用回帖:
4楼: Originally posted by wadecao at 2012-05-19 07:16:19:
第一,你转入的质粒的稳定性不行;
第二,你的菌种需要筛选,选择生长好的再上罐。
主要是质粒稳定性,质粒不稳定,肯定没有目标蛋白表达的。

菌种是经过筛选的,之前用都正常,就是最近老出现这个问题,也换过菌种还是这样
6楼2012-05-21 08:35:01
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wadecao

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

7楼2012-05-21 09:08:03
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