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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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tongxinkxy

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】如何测定某一蛋白在不同组织的表达量?

现在已经知道mRNA序列,请问如何得到每个组织表达量的多少?看哪个组织多,哪个组织少
请问都有什么方法,?什么方法做起来最容易
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rioarsenal

金虫 (正式写手)



rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-21 14:35:57
引用回帖:
Originally posted by tongxinkxy at 2010-12-21 13:37:39:
现在已经知道mRNA序列,请问如何得到每个组织表达量的多少?看哪个组织多,哪个组织少
请问都有什么方法,?什么方法做起来最容易

最直观的方法是 Northern

最简单的方法是:RT-PCR
2楼2010-12-21 13:47:58
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yorkham

铜虫 (小有名气)



tongxinkxy(金币+1):1 2010-12-21 13:57:18
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-21 14:36:03
tongxinkxy(金币+1): 2011-04-26 08:11:10
一种是用实时荧光定量PCR,这个方法很普遍,也省钱容易操作,多为定量
另一种就是Northern Blotting, 需要设计探针,进行杂交,步骤多些,多为定性定位
3楼2010-12-21 13:52:53
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tongxinkxy

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by yorkham at 2010-12-21 13:52:53:
一种是用实时荧光定量PCR,这个方法很普遍,也省钱容易操作,多为定量
另一种就是Northern Blotting, 需要设计探针,进行杂交,步骤多些,多为定性定位

定量和定性定位区别在哪里呢?

这两种方法大概花费都需要多少呢?
4楼2010-12-21 13:58:07
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yorkham

铜虫 (小有名气)



rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-21 14:36:12
荧光定量结果是统计图,有绝对定量和相对定量,绝对定量需要标线,最后表达量是以mRNA 的Copy数表示,相对对量是以内参为标准,表达量以目的基因与内参的比值表示
Northern 的结果是以放射自显影的强度表示
具体多少钱不好算,Real time的荧光染料现在都比较便宜,我们一般用这个,呵呵
5楼2010-12-21 14:19:57
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