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拉拉_1234

铁虫 (初入文坛)

[求助] 外源蛋白占菌体总蛋白量如何测定

请问各位同学们，我现在需要测定自己所表达的蛋白占菌体总蛋白的比例，这个如何测定呀？是有专门的仪器吗？
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1楼2011-11-03 09:20:56
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你可以制备你的目标蛋白的抗体，然后根据抗体鉴定你的蛋白的量，同时测定总蛋白！
如果你仅仅是比较粗略的看，也可以通过走PAGE胶！
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拉拉_1234
致良知
2楼2011-11-03 22:39:39
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拉拉_1234

铁虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by quiller2000 at 2011-11-03 22:39:39:
你可以制备你的目标蛋白的抗体，然后根据抗体鉴定你的蛋白的量，同时测定总蛋白！
如果你仅仅是比较粗略的看，也可以通过走PAGE胶！

还想问一下，跑完PAGE胶就是用眼睛粗略估计一下吗？
我看到别人的材料里面都有具体的百分比，那个可以通过PAGE胶来确定吗？
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3楼2011-11-04 18:46:51
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loganfan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

没有专门的仪器，药典方法是使用ELISA法测的，具体是要先获得宿主菌的抗血清，然后做ELISA分析，有买的试剂盒
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4楼2011-11-04 19:40:18
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

可以，根据PAGE上的条带的光密度计算，很多软件有这个功能
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致良知
5楼2011-11-04 19:45:07
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拉拉_1234

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by quiller2000 at 2011-11-04 19:45:07:
可以，根据PAGE上的条带的光密度计算，很多软件有这个功能

还想请教一下，PAGE上的条带的光密度是用什么来测呢？
要是用这种方法的话就是要把PAGE上所有的条带的光密度都测一下，然后再用自己目的蛋白条带的光密度与所有条带的光密度进行比较？
可以告诉我具体的是哪个软件吗？谢谢！
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6楼2011-11-04 20:49:40
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

拉拉_1234(金币+10): 对我帮助很大，非常感谢！ 2011-11-04 22:20:08
几乎所有的凝胶成像软件都提供
此外，常见的图形分析软件也都可以做
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致良知
7楼2011-11-04 21:47:36
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twisty

木虫 (正式写手)

newer
学习了。
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兼并碱基M=A/CR=A/GW=A/TS=G/CY=C/TK=G/TV=A/G/C&n...
8楼2012-02-26 19:56:57
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