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拉拉_1234

铁虫 (初入文坛)

[求助] 外源蛋白占菌体总蛋白量如何测定

请问各位同学们,我现在需要测定自己所表达的蛋白占菌体总蛋白的比例,这个如何测定呀?是有专门的仪器吗?
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你可以制备你的目标蛋白的抗体,然后根据抗体鉴定你的蛋白的量,同时测定总蛋白!
如果你仅仅是比较粗略的看,也可以通过走PAGE胶!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

致良知
2楼2011-11-03 22:39:39
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拉拉_1234

铁虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by quiller2000 at 2011-11-03 22:39:39:
你可以制备你的目标蛋白的抗体,然后根据抗体鉴定你的蛋白的量,同时测定总蛋白!
如果你仅仅是比较粗略的看,也可以通过走PAGE胶!

还想问一下,跑完PAGE胶就是用眼睛粗略估计一下吗?
我看到别人的材料里面都有具体的百分比,那个可以通过PAGE胶来确定吗?
3楼2011-11-04 18:46:51
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loganfan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

没有专门的仪器,药典方法是使用ELISA法测的,具体是要先获得宿主菌的抗血清,然后做ELISA分析,有买的试剂盒
4楼2011-11-04 19:40:18
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

可以,根据PAGE上的条带的光密度计算,很多软件有这个功能
致良知
5楼2011-11-04 19:45:07
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拉拉_1234

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by quiller2000 at 2011-11-04 19:45:07:
可以,根据PAGE上的条带的光密度计算,很多软件有这个功能

还想请教一下,PAGE上的条带的光密度是用什么来测呢?
要是用这种方法的话就是要把PAGE上所有的条带的光密度都测一下,然后再用自己目的蛋白条带的光密度与所有条带的光密度进行比较?
可以告诉我具体的是哪个软件吗?谢谢!
6楼2011-11-04 20:49:40
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

拉拉_1234(金币+10): 对我帮助很大,非常感谢! 2011-11-04 22:20:08
几乎所有的凝胶成像软件都提供
此外,常见的图形分析软件也都可以做
致良知
7楼2011-11-04 21:47:36
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twisty

木虫 (正式写手)

newer

学习了。
兼并碱基M=A/CR=A/GW=A/TS=G/CY=C/TK=G/TV=A/G/C&n...
8楼2012-02-26 19:56:57
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