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[交流]
【求助/交流】蛋白质含量测定问题
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| 各位生物界的达人，请教个问题，我是材料学专业的，但是我的课题涉及到样品蛋白质含量的测定，我也查了一些资料，有很多方法，比如紫外分光光度法，开始要绘制标准曲线，我想问的是，大多数用的是牛血清蛋白做标准样品，而我的样品中蛋白质类型不一样，能否参照标准曲线。还有既然是标准曲线我是不是不用自己绘制，直接参照别人的，因为标准样品都是一样的啊，但是我在网上查的很多标准曲线相差很大，都不一样啊，请各位指导下？可能问的问题大家觉得可笑，但还是想听下大家的意见！谢谢~~~~ |
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2楼2011-01-17 20:16:38
3楼2011-01-17 20:25:13
wissl52100(金币+2): 谢谢~ 2011-01-18 10:41:34
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本帖内容被屏蔽 |
7楼2011-01-18 10:27:12
wissl52100(金币+2): 谢谢 2011-01-18 14:03:19
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买个试剂盒就可以了，上海生工有 BCA Protein Assay Kit BCA蛋白质定量检测试剂盒 产品说明：BCA法是理想的蛋白质定量方法，在碱性环境下蛋白质分子中肽键结构与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。BCA特异地与Cu1结合形成稳定的紫蓝色复合物，在562 nM处有最大的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，颜色的深浅与蛋白质的含量成正比，可以根据吸收值测定蛋白质浓度。该测定方法灵敏度高，操作简单，试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳，并且受干扰物质去垢剂等影响小。 产品特点： 1.准确灵敏，线性范围广，BCA试剂的蛋白质测定范围是25－500μg/ml; 2.快速：45分钟内完成测定，比经典的Lowry法快4倍而且更加方便; 3.不受样品中离子型和非离子型去污剂影响; 4.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝,可以酶标板法或分光光度计法测定蛋白质浓度。 编号 包装 价格 产地 SK3021 500 Assays 450 生工 |
8楼2011-01-18 12:36:33
23楼2012-10-30 17:03:49
4楼2011-01-17 21:48:37
5楼2011-01-18 09:19:08
6楼2011-01-18 10:12:24
9楼2011-01-18 15:21:57
10楼2011-01-18 19:13:00
11楼2011-01-19 10:28:53
12楼2011-04-08 15:48:32
13楼2011-04-08 16:30:32
14楼2011-04-10 11:48:59
15楼2011-04-14 21:29:33
16楼2011-08-04 15:58:32
17楼2011-12-06 09:40:00
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+3): 鼓励交流 2012-02-13 17:57:15
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+3): 鼓励交流 2012-02-13 17:57:15
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我们用的是lowry法,你的线性梯度可以这么设置,牛血清蛋白稀释到0.1mg每毫升,精确稀释,然后梯度是,0ul,200ul,400ul,600ul,800ul,1000ul,统一用水补到1ml.样品的话稀释到浓度50ug每毫升. 但是这个方法影响因素多,得研究下你的缓冲体系有没有影响物质,一般有氧化还原的东西都不行,BCA原理也是氧化还原,考染的话我很少做,但是个人觉得这方法误差可能大些.另外关键的一点是你所测的蛋白结构不能与牛血清蛋白差太多,差太多就没有意义了.紫外扫描的话是苯环状氨基酸吸收,纯度好的话可以用,建议你两种方法对比研究. |
18楼2012-02-13 17:24:02
19楼2012-02-13 17:25:32
20楼2012-05-14 11:12:49
21楼2012-10-19 21:07:49
22楼2012-10-30 17:00:30
 本帖仅楼主可见 |
24楼2013-10-08 14:10:43
25楼2017-02-11 13:12:34