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【求助/交流】蛋白质含量测定问题
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wissl52100
铜虫
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虫号: 487077
[交流]
【求助/交流】蛋白质含量测定问题
各位生物界的达人,请教个问题,我是材料学专业的,但是我的课题涉及到样品蛋白质含量的测定,我也查了一些资料,有很多方法,比如紫外分光光度法,开始要绘制标准曲线,我想问的是,大多数用的是牛血清蛋白做标准样品,而我的样品中蛋白质类型不一样,能否参照标准曲线。还有既然是标准曲线我是不是不用自己绘制,直接参照别人的,因为标准样品都是一样的啊,但是我在网上查的很多标准曲线相差很大,都不一样啊,请各位指导下?可能问的问题大家觉得可笑,但还是想听下大家的意见!谢谢~~~~
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1楼
2011-01-17 20:12:14
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xhjggl
木虫
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wissl52100(金币+2): 谢谢 2011-01-18 14:03:19
买个试剂盒就可以了,上海生工有
BCA Protein Assay Kit
BCA蛋白质定量检测试剂盒
产品说明:BCA法是理想的蛋白质定量方法,在碱性环境下蛋白质分子中肽键结构与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。BCA特异地与Cu1结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nM处有最大的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,颜色的深浅与蛋白质的含量成正比,可以根据吸收值测定蛋白质浓度。该测定方法灵敏度高,操作简单,试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳,并且受干扰物质去垢剂等影响小。
产品特点:
1.准确灵敏,线性范围广,BCA试剂的蛋白质测定范围是25-500μg/ml;
2.快速:45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便;
3.不受样品中离子型和非离子型去污剂影响;
4.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝,可以酶标板法或分光光度计法测定蛋白质浓度。
编号 包装 价格 产地
SK3021 500 Assays 450 生工
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8楼
2011-01-18 12:36:33
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wissl52100
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还有个问题,就是做紫外的时候,好像样品的蛋白质浓度有范围规定,在0.1~1mg/ml之间,但是我的样品我也不知道蛋白质的浓度在什么范围内,那该怎么办啊?
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2011-01-17 20:16:38
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wuw579
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rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-17 22:53:31
wissl52100(金币+2): 2011-01-18 10:41:48
标准曲线还是要自己做,不同人不同仪器不同操作方法得出来的结果都不一样。
选择标准蛋白也要因试验而异。
可以多做几个梯度。
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3楼
2011-01-17 20:25:13
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wissl52100
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Originally posted by
wuw579
at 2011-01-17 20:25:13:
标准曲线还是要自己做,不同人不同仪器不同操作方法得出来的结果都不一样。
选择标准蛋白也要因试验而异。
可以多做几个梯度。
什么叫多做几个梯度?我看一些资料中写到蛋白质含量可以直接算出:c=1.45A280-0.74A260 这是不是说可以不用做标准曲线了,我的课题在蛋白质含量测量不用特别精确,直接按上式算可取吗?
还我我2楼提到的这个问题,样品蛋白质含量范围无法确定,该怎么办?
还请赐教!谢谢~
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4楼
2011-01-17 21:48:37
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