应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 可溶性蛋白含量测定
141/1返回列表
查看: 4982  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

殷灿灿

新虫 (小有名气)

[交流] 可溶性蛋白含量测定

为什么我在用考马斯亮蓝比色法测可溶性蛋白含量做标准曲线时，按照标准方法加的试剂，颜色反应却不明显，试剂没有问题，请各位赐教了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-03-22 14:51:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

殷灿灿

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaoxia at 2012-03-22 15:38:49:
你的标准溶液浓度是按方法中一样的吗？
采用考马斯亮蓝G-250染色法：
标准曲线的制作：取6支具塞试管，编号，并加入100μg/mL牛血清白蛋白标准溶液溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，用蒸馏水补至1.0mL，混匀后 ...

方法完全是你说的那样，但就是吸光度值特低，而且不同浓度处理吸光度没什么变化，真是搞不懂
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-22 15:44:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ningda47

金虫 (小有名气)
★
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
引用回帖:
4楼: Originally posted by 殷灿灿 at 2012-03-22 15:44:23:
方法完全是你说的那样，但就是吸光度值特低，而且不同浓度处理吸光度没什么变化，真是搞不懂

这个牛血清白蛋白用的是那种的啊，牛血清白蛋白（全组分）和牛血清白蛋白V，哪一种啊
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2012-04-24 09:42:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

迷糊的orange

银虫 (小有名气)
★
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
有可能是你测的物质中蛋白含量太低了
赞一下 回复此楼
2楼2012-03-22 14:58:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhaoxia

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
树树8013: 金币+2, 谢谢细心回答。 2012-04-25 18:43:30
你的标准溶液浓度是按方法中一样的吗？
采用考马斯亮蓝G-250染色法：
标准曲线的制作：取6支具塞试管，编号，并加入100μg/mL牛血清白蛋白标准溶液溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，用蒸馏水补至1.0mL，混匀后，向各试管中加入5.0mL考马斯亮蓝G-250溶液，立即充分混合，静置2min后，以0管为空白对照，在波长595nm处测定吸光度值。以蛋白质质量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，求得线性回归方程。
100μg/mL牛血清白蛋白标准溶液的配制：称取25mg牛血清白蛋白，加入蒸馏水溶解并定容至100mL。吸取上述溶液40mL，用蒸馏水稀释至100mL即可。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

殷灿灿
3楼2012-03-22 15:38:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangpei1991

金虫 (正式写手)
★
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
应该是蛋白浓度问题 还有就是分光光度计测的值应最好在0.2-0.8之间
赞一下 回复此楼
5楼2012-03-22 16:22:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kading

金虫 (正式写手)
★
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
只要是测出来结果对就行了啊，前面颜色什么的不重要啊，和很多因素有关的啊
赞一下 回复此楼
6楼2012-03-27 08:15:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaqia832

铜虫 (正式写手)
★ ★
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
树树8013: 金币+1, 谢谢提示，请继续关注食品板块。版主奖励。 2012-04-25 18:44:06
标准蛋白浓度是不是有问题，还有考马斯亮蓝溶液配制后最好放置一周，这样测得的标准曲线会好点儿
赞一下 回复此楼
9楼2012-04-24 09:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冯淼淼2011

新虫 (初入文坛)
★
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
您好，这个问题您解决了吗，我最近也遇到类似的问题了！
赞一下 回复此楼
10楼2014-04-22 09:48:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

没入尘埃5

金虫 (小有名气)
★
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaoxia at 2012-03-22 15:38:49
你的标准溶液浓度是按方法中一样的吗？
采用考马斯亮蓝G-250染色法：
标准曲线的制作：取6支具塞试管，编号，并加入100μg/mL牛血清白蛋白标准溶液溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，用蒸馏水补至1.0mL，混匀后， ...

你好，我看到你测定可溶性蛋白的方法，有几个问题想要想你咨询一下：
1 配制考马斯亮蓝母液的时候，有的说要用无水乙醇，有的说要95%的乙醇，这两种乙醇配出来的考马斯亮蓝效果有区别吗？乙醇和磷酸的作用都是什么啊？
2 我看到有的资料里做标准曲线的溶液不是用蒸馏水补足1ml，是用Nacl补足的，这有什么区别吗？Nacl的作用是什么啊？
谢谢啦！
赞一下 回复此楼
11楼2014-06-27 08:20:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by qiaqia832 at 2012-04-24 09:58:10
标准蛋白浓度是不是有问题，还有考马斯亮蓝溶液配制后最好放置一周，这样测得的标准曲线会好点儿

你好，请问考马斯亮蓝溶液放置一周是指的考马斯亮蓝母液放置一周吗？考马斯亮蓝溶液是用无水乙醇配置还是95%乙醇？有什么区别？
赞一下 回复此楼
12楼2014-06-27 08:22:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cz0919

新虫 (小有名气)
★
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
我的标曲竟然是负值，谁知道什么情况？样品0.2多正常
赞一下 回复此楼
13楼2015-11-26 21:44:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小558

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by ningda47 at 2012-04-24 09:42:06
这个牛血清白蛋白用的是那种的啊，牛血清白蛋白（全组分）和牛血清白蛋白V，哪一种啊...

不同的血清蛋白会影响结果吗
赞一下 回复此楼
14楼2017-11-23 16:24:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
yqfjp0237楼
2012-03-27 08:19   回复  
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 殷灿灿 的主题更新
141/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭