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殷灿灿

新虫 (小有名气)


[交流] 可溶性蛋白含量测定

为什么我在用考马斯亮蓝比色法测可溶性蛋白含量做标准曲线时,按照标准方法加的试剂,颜色反应却不明显,试剂没有问题,请各位赐教了
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殷灿灿

新虫 (小有名气)


送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaoxia at 2012-03-22 15:38:49:
你的标准溶液浓度是按方法中一样的吗?
采用考马斯亮蓝G-250染色法:
标准曲线的制作:取6支具塞试管,编号,并加入100μg/mL牛血清白蛋白标准溶液溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,用蒸馏水补至1.0mL,混匀后 ...

方法完全是你说的那样,但就是吸光度值特低,而且不同浓度处理吸光度没什么变化,真是搞不懂
4楼2012-03-22 15:44:23
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迷糊的orange

银虫 (小有名气)



殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
有可能是你测的物质中蛋白含量太低了
2楼2012-03-22 14:58:20
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liuzhaoxia

金虫 (正式写手)


★ ★ ★
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
树树8013: 金币+2, 谢谢细心回答。 2012-04-25 18:43:30
你的标准溶液浓度是按方法中一样的吗?
采用考马斯亮蓝G-250染色法:
标准曲线的制作:取6支具塞试管,编号,并加入100μg/mL牛血清白蛋白标准溶液溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,用蒸馏水补至1.0mL,混匀后,向各试管中加入5.0mL考马斯亮蓝G-250溶液,立即充分混合,静置2min后,以0管为空白对照,在波长595nm处测定吸光度值。以蛋白质质量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线,求得线性回归方程。
100μg/mL牛血清白蛋白标准溶液的配制:称取25mg牛血清白蛋白,加入蒸馏水溶解并定容至100mL。吸取上述溶液40mL,用蒸馏水稀释至100mL即可。

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3楼2012-03-22 15:38:49
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wangpei1991

金虫 (正式写手)



殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
应该是蛋白浓度问题 还有就是分光光度计测的值应最好在0.2-0.8之间
5楼2012-03-22 16:22:29
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