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殷灿灿

新虫 (小有名气)

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[交流] 可溶性蛋白含量测定

为什么我在用考马斯亮蓝比色法测可溶性蛋白含量做标准曲线时，按照标准方法加的试剂，颜色反应却不明显，试剂没有问题，请各位赐教了

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1楼2012-03-22 14:51:43

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liuzhaoxia

金虫 (正式写手)

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★ ★ ★
殷灿灿(金币+2): 谢谢参与
树树8013: 金币+2, 谢谢细心回答。 2012-04-25 18:43:30

你的标准溶液浓度是按方法中一样的吗？
采用考马斯亮蓝G-250染色法：
标准曲线的制作：取6支具塞试管，编号，并加入100μg/mL牛血清白蛋白标准溶液溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，用蒸馏水补至1.0mL，混匀后，向各试管中加入5.0mL考马斯亮蓝G-250溶液，立即充分混合，静置2min后，以0管为空白对照，在波长595nm处测定吸光度值。以蛋白质质量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，求得线性回归方程。
100μg/mL牛血清白蛋白标准溶液的配制：称取25mg牛血清白蛋白，加入蒸馏水溶解并定容至100mL。吸取上述溶液40mL，用蒸馏水稀释至100mL即可。