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科研检测交流
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[交流]
【实验干货】生物超薄切片+HRTEM：线粒体嵴原子像一步到位
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【取材】 心肌1 mm³，3 %戊二醛-0.1 m二甲胂酸钠4 ℃过夜，防冰晶；pbs洗3×10 min，去游离醛。 【后固定】 1 % oso4 4 ℃ 1 h，导电+反差；梯度丙酮30-50-70-90-100 %各10 min，彻底脱水。 【包埋】 epon 812梯度渗透2 h，纯树脂过夜；60 ℃聚合48 h，硬度适中，切片不颤。 【切片】 钻石刀45°，70 nm银白光，200目铜网捞片；2 %醋酸铀酰-柠檬酸铅各5 min，双染色增衬。 【hrtem】 tf-20 200 kv，低剂量<100 e⁻ Å⁻²，spot 9，c s≈0，像素0.05 nm；线粒体嵴0.22 nm晶格可见，无辐照皱缩。 【心得】 铍台plasma 30 s除烃；干燥剂保存<24 h上机，防吸水变形；autoctf自动校正像散，30 min拿原子级gif，导师群秒赞！ |
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