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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 环境生态 » 【求助】考马斯测定蛋白质含量时稀释倍数怎么定
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慧珍huizhen

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】考马斯测定蛋白质含量时稀释倍数怎么定已有6人参与

大家好，我在做考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量时用的是蚯蚓，结果稀释了酶液稀释了500倍测出的吸光度还是大于1，该怎么办呢？谢谢。
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1楼2010-05-27 22:11:15
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匿名

本帖仅楼主可见
2楼2010-05-27 22:23:51
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慧珍huizhen

新虫 (初入文坛)
之前取0.01ml的酶稀释到50ml（哦，应该是500倍了），结果还是很蓝，那样结果肯定大于1，因为我们做的样比较多，而50ml的容器没有那么多呢，所以就没有再稀释了。
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3楼2010-05-27 22:37:21
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潜水驴枫叶

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你应该先用考马斯亮兰和标准marker做标准曲线，然后再做样品蛋白，一般是2.5到5的样品蛋白加trir-hcl到1ml，再加考马斯亮兰1-1.5ml
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此人已死，有事烧纸。为期一年，勿问缘由！
4楼2010-05-28 17:07:36
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lihui1984

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
poyoro(金币+1):积极^_^ 2010-06-12 15:03:28
用紫外分光光度计测的话，如果测量值不大于2，数据都视为是准确的。我们测蛋白的时候经常有大于1的，这没有问题
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5楼2010-05-28 17:15:38
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StephenXun

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同意~~~大于一并不是什么不好的数据~~
引用回帖:
Originally posted by lihui1984 at 2010-05-28 17:15:38:
用紫外分光光度计测的话，如果测量值不大于2，数据都视为是准确的。我们测蛋白的时候经常有大于1的，这没有问题

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JLU-NTU-USC.MembraneTechnology.Motto:Truth,Innovation,Aspiration,Dedication.
6楼2010-05-29 08:29:11
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慧珍huizhen

新虫 (初入文坛)
谢谢大家的回复，今天去做正式的实验，结果稀释了50倍就好了，呵呵，那天不知道出了什么问题，谢谢罗。
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7楼2010-05-30 19:51:29
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helenwang

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
poyoro(金币+1):积极参与^_^ 2010-06-12 15:03:58
应该在0.2~0.3左右比较好，以前也用过，感觉这个范围的精确度比较好
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8楼2010-06-12 14:57:06
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