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小辉辉

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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

裂解之后得到的蛋白质浓度很大的,可以稀释之后再测定,如果不放心,就用缓冲液来稀释,就能把干扰因素降低了。

对于标准曲线来说不是毫无上限和下限的,可能是试剂灵敏度不够、仪器不能分辨颜色深度、显色剂过少,所以你要自己摸索一下。

考马斯亮蓝测蛋白在测OD的时候,用蒸馏水和考马斯亮蓝染液的混合物溶液来调零,因为试剂本身也是有吸光度的。

BSA的配制,我没想到那么多,是用水而已。

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流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2012-03-02 00:26:52
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xhjggl

木虫 (正式写手)

可以到上海生工网站上下载产品编号为SK3031  SK3041  SK3071的说明书看看

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7楼2012-03-03 13:22:41
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普通回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
看天(金币+3): 鼓励交流 2012-03-01 15:27:14
请先看旧帖,宗家大小姐日向雏田

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3528663&page=1#pid736159
[求助]考马斯亮蓝法测蛋白含量时吸光度A595nm为负值!!!求助


http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3315351&page=3#pid1887491
求助!关于考马斯亮蓝制作标准蛋白曲线的问题,麻烦各位进来看下!
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3315351&page=1#pid1481204
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2楼2012-03-01 01:37:19
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匿名

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小辉辉

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3楼2012-03-01 10:30:51
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4楼2012-03-01 23:09:53
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6楼2012-03-03 10:10:43
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

我刚加入论坛的时候还选择应助,后来就不再选了,因为我不确定自己的回帖是否有价值,而且我也不缺金币。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2012-03-04 00:26:02
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9楼2012-03-04 21:33:32
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396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
huichenshen(金币+8): 非常感谢! 2012-03-08 22:06:08
对于第一个问题,既然提到了超声破碎,当然用这个时要注意破碎的功率和时间;
2、缓冲液的PH对于蛋白质而言通常用到PBS,Trise-HCl,碳酸盐缓冲液等,当然也要看你的目标蛋白的Pi值。
3考马斯测蛋白浓度,校零使用2.5ml的考马斯和0.5的水(总体积3ml)进行校零的。
4、考马斯测定蛋白浓度范围在0-150ug/ml,超出这个范围就不准确了,当然这个方法也有其本事的偏差,我们自己测的时候有时候也不成倍数关系。
5、对于BSA而言,作为标准曲线的制作,我们通常是用水配制的,我是第一次听见要用NaCl配制的,恕我才疏学浅!
人生的三大悲剧:不知道选择,不坚持选择,不断选择!
10楼2012-03-05 12:53:40
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