应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌体如何破碎？求助
111/2返回列表12下一页
查看: 5528  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

M110935

金虫 (小有名气)

[求助] 菌体如何破碎？求助

最近要收集菌体，然后破碎细菌分离上清和包涵体。请问菌体收集后，如何使细菌破碎呢？具体步骤，谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-31 09:50:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

M110935

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-08-31 11:16:37
最常用的就是超声裂解，简单方便！

能具体说下操作步骤吗？菌体收集起来后，加的什么裂解液？破碎时的条件？谢谢
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2012-08-31 14:19:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

太极拳

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-31 16:00:23
M110935: 金币+1, ★有帮助 2012-09-02 08:45:33
我用的是菌体收集之后，加入Tris-HCl悬浮，然后在超声破碎仪下进行破碎，功率和时间根据菌液多少确定。最好在冰上进行破碎，菌液破碎前为乳白色，菌体破碎完毕后为透明，看起来比较澄清。破碎过程中功率不应过大，不能产生大量气泡，否则会破坏蛋白。。。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2012-08-31 14:36:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

王礼鹏

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-31 16:00:02
加裂解液超声破碎，功率和时间视菌体量而定，开始时可以功率和时间都低点，这样如果没有破碎好，可以继续破碎。工作5秒，停10秒，至乳白色，或用显微镜观察
赞一下 回复此楼
2楼2012-08-31 10:03:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最常用的就是超声裂解，简单方便！
赞一下 回复此楼
持之以恒、永不放弃！
3楼2012-08-31 11:16:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
超声波，碱裂解之类的用的都比较普遍.
赞一下 回复此楼
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
4楼2012-08-31 11:25:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

M110935

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Marado at 2012-08-31 11:25:49
超声波，碱裂解之类的用的都比较普遍.

能具体说下操作步骤吗？菌体收集起来后，加的什么裂解液？破碎时的条件？谢谢
赞一下 回复此楼
6楼2012-08-31 14:19:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xfliu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-01 15:43:04
M110935: 金币+1, ★有帮助 2012-09-02 08:46:18
以菌液1/20体积的1倍的PBS缓冲液悬浮细菌，冰上超声破碎，注意功率不要太高，不要起气泡。循环数不要太多，运行2S、间歇6s。如果包涵体含量不是太大的话，几十个循环下来就基本透明了，就可以进行下一步了。包涵体太多的话，再多的循环也透明不了
赞一下 回复此楼
8楼2012-08-31 17:35:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhoucd07net

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
超声破碎，破碎后的颜色要看你是什么蛋白，澄清……
赞一下 回复此楼
9楼2012-09-01 07:20:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qq893137

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

工业生产一般先使用碟片离心机进行菌体收集，然后使用高压均质机进行菌体破碎，再使用离心机去除包涵体
赞一下 回复此楼
10楼2013-07-03 16:20:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 M110935 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭