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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】如何提取细菌的细胞膜
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beibei3372

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】如何提取细菌的细胞膜 已有5人参与

原核细胞胞内并没有细胞器，所以也就不会有膜成分，那么这样的话，给菌体破碎再离心，得到的沉淀理论上就应该只有细胞膜，可以这样提取细胞膜吗？具体的离心应该怎样设计呢？
非常感谢哈~
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1楼 2010-04-18 17:00:52
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-19 22:56
beibei3372(金币+1):谢了哈！ 2010-04-20 21:06
引用回帖:
Originally posted by beibei3372 at 2010-04-18 17:00:52:
原核细胞胞内并没有细胞器，所以也就不会有膜成分，那么这样的话，给菌体破碎再离心，得到的沉淀理论上就应该只有细胞膜，可以这样提取细胞膜吗？具体的离心应该怎样设计呢？
非常感谢哈~

membrane protein extraction 搜索ScienceDirect  可以有很多文章。

得到的沉淀，理论上可以是未破碎的菌体（也就有菌体胞内蛋白）、核酸和蛋白混合物。。。细胞膜碎片+膜蛋白。。。。还有发酵液固形成分。。等等。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2010-04-19 11:45:19
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wxd2006

beibei3372(金币+1):谢了哈！ 2010-04-20 21:06
给菌体破碎再离心，得到的沉淀理论上就应该只有细胞膜，
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2楼2010-04-19 08:57:57
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ben1147

木虫 (正式写手)
这个看你要做什么了，只需要膜的脂双层还是也要膜蛋白
再选择用水双相还是密度梯度之类的方法了
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7楼2010-06-05 22:38:19
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
8楼: Originally posted by 小墨825 at 2013-06-27 09:24:14
请问者为虫友，目的是要膜蛋白，可是我们没有超高速离心机，要怎么将膜部分提取出来或者怎么去除膜部分呢？...

很多公司有膜蛋白提取试剂盒，用有机溶剂抽提的，不用超速离心，普通的离心机就可以。
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9楼2013-06-28 15:31:18
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beibei3372

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by wxd2006 at 2010-04-19 08:57:57:
给菌体破碎再离心，得到的沉淀理论上就应该只有细胞膜，

请问该怎样设计离心步骤呢……
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4楼2010-04-19 21:39:09
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beibei3372

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2010-04-19 11:45:19:



membrane protein extraction 搜索ScienceDirect  可以有很多文章。

得到的沉淀，理论上可以是未破碎的菌体（也就有菌体胞内蛋白）、核酸和蛋白混合物。。。细胞膜碎片+膜蛋白。。。。还有发酵液固形成分 ...

文献大多是介绍膜蛋白的抽提的，膜蛋白的抽提和细胞膜的抽提应该是不一样的吧，
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5楼2010-04-19 21:41:30
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xyls6868

新虫 (小有名气)
有试剂盒吧
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6楼2010-06-05 22:34:31
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小墨825

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by ben1147 at 2010-06-05 22:38:19
这个看你要做什么了，只需要膜的脂双层还是也要膜蛋白
再选择用水双相还是密度梯度之类的方法了

请问者为虫友，目的是要膜蛋白，可是我们没有超高速离心机，要怎么将膜部分提取出来或者怎么去除膜部分呢？
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8楼2013-06-27 09:24:14
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小墨825

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by ben1147 at 2013-06-28 15:31:18
很多公司有膜蛋白提取试剂盒，用有机溶剂抽提的，不用超速离心，普通的离心机就可以。...

除了这个还有其它办法吗？因为导师不一定同意给我们买试剂盒，况且我们需要大的酶量。现在我们用Triton X-100来溶出，又两个酶怎么都纯化不出来，不知道您能给什么建议
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10楼2013-06-28 20:19:50
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