| 查看: 3866 | 回复: 7 | |||
| 本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
没有烟总有花新虫 (初入文坛)
|
[求助]
包涵体洗涤后8M尿素不溶解
|
||
| 包涵体洗涤后8M尿素不溶解 用了6M的盐酸胍，但是后期要复性 这个蛋白疏水性也不强 二硫键就一对 有3个半胱氨酸 分子量大小是86KD 为什么那么难溶解呢 ？如果用盐酸胍是不是后期的复性比较困难，求助。。。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有70人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR产物经酶切电泳后所得的基因型与测序结果不一致，是何原因？该如何处理？
已经有10人回复
- 关于NBS的溶解性问题
已经有19人回复
- 请问乙酸钠在乙醇中的溶解度
已经有16人回复
- 魔芋粉如何溶解
已经有5人回复
- 求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
已经有17人回复
- 【求助/交流】如何使包涵体最大程度溶解
已经有5人回复
2楼2011-06-22 16:48:27
3楼2011-06-22 16:53:34
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): 高人啊 2011-06-23 14:46:01
西瓜(金币+5, EPI+1): 高人啊 2011-06-23 14:46:01
|
从你的描述来看，包涵体难溶可能是和蛋白过大有关，解决方法很多，除了盐酸胍外，还可尝试： 1、从表达方面：诱导表达的时候菌液不要太浓，诱导温度低一点，诱导剂量减少一些，表达时间适当延长，因为慢表达才能让你的蛋白有更多的资源用在表达后的折叠上，尽量去避免形成太“结实”的包涵体； 2、最直接最好用的方法：包涵体溶到8M尿素里后冰浴再打个5-10分钟的超声，我遇到的大多数“顽固”包涵体都会溶解的，从超声仪里拿出来就可以直接看到不溶的包涵体变得澄清了。试试看吧。 |
4楼2011-06-22 22:25:51
gwbk
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 54
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2293.5
- 红花: 24
- 帖子: 529
- 在线: 186.9小时
- 虫号: 1320681
- 注册: 2011-06-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
5楼2011-06-23 01:02:34
6楼2011-06-23 11:38:44
永峰1230
铜虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 239.8
- 散金: 8
- 帖子: 251
- 在线: 108.7小时
- 虫号: 2638768
- 注册: 2013-09-06
- 性别: GG
- 专业: 食品加工技术
7楼2014-03-16 15:57:13
8楼2014-07-08 16:13:52
