| 查看: 3850 | 回复: 7 | |||
| 本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
没有烟总有花新虫 (初入文坛)
|
[求助]
包涵体洗涤后8M尿素不溶解
|
||
| 包涵体洗涤后8M尿素不溶解 用了6M的盐酸胍，但是后期要复性 这个蛋白疏水性也不强 二硫键就一对 有3个半胱氨酸 分子量大小是86KD 为什么那么难溶解呢 ？如果用盐酸胍是不是后期的复性比较困难，求助。。。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有94人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR产物经酶切电泳后所得的基因型与测序结果不一致，是何原因？该如何处理？
已经有10人回复
- 关于NBS的溶解性问题
已经有19人回复
- 请问乙酸钠在乙醇中的溶解度
已经有16人回复
- 魔芋粉如何溶解
已经有5人回复
- 求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
已经有17人回复
- 【求助/交流】如何使包涵体最大程度溶解
已经有5人回复
8楼2014-07-08 16:13:52
2楼2011-06-22 16:48:27
3楼2011-06-22 16:53:34
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): 高人啊 2011-06-23 14:46:01
西瓜(金币+5, EPI+1): 高人啊 2011-06-23 14:46:01
|
从你的描述来看，包涵体难溶可能是和蛋白过大有关，解决方法很多，除了盐酸胍外，还可尝试： 1、从表达方面：诱导表达的时候菌液不要太浓，诱导温度低一点，诱导剂量减少一些，表达时间适当延长，因为慢表达才能让你的蛋白有更多的资源用在表达后的折叠上，尽量去避免形成太“结实”的包涵体； 2、最直接最好用的方法：包涵体溶到8M尿素里后冰浴再打个5-10分钟的超声，我遇到的大多数“顽固”包涵体都会溶解的，从超声仪里拿出来就可以直接看到不溶的包涵体变得澄清了。试试看吧。 |
4楼2011-06-22 22:25:51
40