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【求助/交流】如何使包涵体最大程度溶解
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chyqiu
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[交流]
【求助/交流】如何使包涵体最大程度溶解
已有5人参与
向各位虫友请教,我们用大肠杆菌表达的包涵体沉淀,在8M尿素,10mM Tris-HCl,4mM的DTT中裂解,但很大一部分包涵体没溶解,现在这个问题很棘手,请各位虫友帮帮忙!!!
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2010-06-18 11:42:03
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dhd997(金币+1):谢谢交流。嘿嘿 2010-06-18 13:01:38
chyqiu(金币+1): 2010-06-18 13:48:21
不溶解有可能是尿素饱和了,你收集上清,将沉淀加入新的尿素再溶解看看~~
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坚持能无数次改变人生的风景,因为只要路是对的,就不怕远~~~
2楼
2010-06-18 12:39:27
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1949stone:不形成包涵体大量表达会有问题 2010-06-18 13:18:58
chyqiu(金币+1): 2010-06-19 19:18:53
最好的办法就是不让他现成包涵体
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52187644
3楼
2010-06-18 13:14:21
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专业: 微生物遗传育种学
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
可以先用3M的尿素洗 把杂质洗掉到了 再用8M的尿素溶 效果会好的
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感恩每一天的到来
4楼
2010-06-21 22:28:02
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chyqiu
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专业: 生物化学
非常感谢
我先用低浓度的尿素洗涤,然后再分多次进行裂解,确实溶解效果比较好。非常感谢!!!
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5楼
2010-06-27 22:28:27
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6M盐酸胍溶解吧。
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2010-06-28 11:22:43
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