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慧珍huizhen

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】考马斯测定蛋白质含量时稀释倍数怎么定 已有6人参与

大家好,我在做考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量时用的是蚯蚓,结果稀释了酶液稀释了500倍测出的吸光度还是大于1,该怎么办呢?谢谢。
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匿名

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2楼2010-05-27 22:23:51
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慧珍huizhen

新虫 (初入文坛)

之前取0.01ml的酶稀释到50ml(哦,应该是500倍了),结果还是很蓝,那样结果肯定大于1,因为我们做的样比较多,而50ml的容器没有那么多呢,所以就没有再稀释了。
3楼2010-05-27 22:37:21
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潜水驴枫叶

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你应该先用考马斯亮兰和标准marker做标准曲线,然后再做样品蛋白,一般是2.5到5的样品蛋白加trir-hcl到1ml,再加考马斯亮兰1-1.5ml
此人已死,有事烧纸。为期一年,勿问缘由!
4楼2010-05-28 17:07:36
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lihui1984

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
poyoro(金币+1):积极^_^ 2010-06-12 15:03:28
用紫外分光光度计测的话,如果测量值不大于2,数据都视为是准确的。我们测蛋白的时候经常有大于1的,这没有问题
5楼2010-05-28 17:15:38
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StephenXun

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
同意~~~大于一并不是什么不好的数据~~
引用回帖:
Originally posted by lihui1984 at 2010-05-28 17:15:38:
用紫外分光光度计测的话,如果测量值不大于2,数据都视为是准确的。我们测蛋白的时候经常有大于1的,这没有问题

JLU-NTU-USC.MembraneTechnology.Motto:Truth,Innovation,Aspiration,Dedication.
6楼2010-05-29 08:29:11
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慧珍huizhen

新虫 (初入文坛)

谢谢大家的回复,今天去做正式的实验,结果稀释了50倍就好了,呵呵,那天不知道出了什么问题,谢谢罗。
7楼2010-05-30 19:51:29
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helenwang

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
poyoro(金币+1):积极参与^_^ 2010-06-12 15:03:58
应该在0.2~0.3左右比较好,以前也用过,感觉这个范围的精确度比较好
8楼2010-06-12 14:57:06
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