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【求助/交流】蛋白质含量测定问题
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wissl52100
铜虫
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(幼儿园)
金币: 70.8
帖子: 59
在线: 32.1小时
虫号: 487077
[交流]
【求助/交流】蛋白质含量测定问题
各位生物界的达人,请教个问题,我是材料学专业的,但是我的课题涉及到样品蛋白质含量的测定,我也查了一些资料,有很多方法,比如紫外分光光度法,开始要绘制标准曲线,我想问的是,大多数用的是牛血清蛋白做标准样品,而我的样品中蛋白质类型不一样,能否参照标准曲线。还有既然是标准曲线我是不是不用自己绘制,直接参照别人的,因为标准样品都是一样的啊,但是我在网上查的很多标准曲线相差很大,都不一样啊,请各位指导下?可能问的问题大家觉得可笑,但还是想听下大家的意见!谢谢~~~~
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2011-01-17 20:12:14
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colorfulmiao
木虫
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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1560425楼
:
Originally posted by
guohq0316
at 2011-08-04 15:58:32:
你好:我需要测定豆饼粉中蛋白质的含量,请教我该如何去做,因为豆饼粉不宜溶解,在pH=7时的磷酸缓冲盐中部分溶解但也不保证蛋白质完全溶解,急...凯氏定氮法不准确。不知道该如何办?
根据我的知识,如果样品不易溶解,目前的蛋白浓度测定都不行的,因为现在的考马斯、BCA方法测定都是比色法的,蛋白不溶解就没办法比色了呀。
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20楼
2012-05-14 11:12:49
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wissl52100
铜虫
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虫号: 487077
还有个问题,就是做紫外的时候,好像样品的蛋白质浓度有范围规定,在0.1~1mg/ml之间,但是我的样品我也不知道蛋白质的浓度在什么范围内,那该怎么办啊?
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2楼
2011-01-17 20:16:38
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wuw579
铁杆木虫
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★
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-17 22:53:31
wissl52100(金币+2): 2011-01-18 10:41:48
标准曲线还是要自己做,不同人不同仪器不同操作方法得出来的结果都不一样。
选择标准蛋白也要因试验而异。
可以多做几个梯度。
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3楼
2011-01-17 20:25:13
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wissl52100
铜虫
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Originally posted by
wuw579
at 2011-01-17 20:25:13:
标准曲线还是要自己做,不同人不同仪器不同操作方法得出来的结果都不一样。
选择标准蛋白也要因试验而异。
可以多做几个梯度。
什么叫多做几个梯度?我看一些资料中写到蛋白质含量可以直接算出:c=1.45A280-0.74A260 这是不是说可以不用做标准曲线了,我的课题在蛋白质含量测量不用特别精确,直接按上式算可取吗?
还我我2楼提到的这个问题,样品蛋白质含量范围无法确定,该怎么办?
还请赐教!谢谢~
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4楼
2011-01-17 21:48:37
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