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★ 小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖 小丹木木(金币+3): 鼓励交流 2012-02-13 17:57:15
我们用的是lowry法,你的线性梯度可以这么设置,牛血清蛋白稀释到0.1mg每毫升,精确稀释,然后梯度是,0ul,200ul,400ul,600ul,800ul,1000ul,统一用水补到1ml.样品的话稀释到浓度50ug每毫升.
但是这个方法影响因素多,得研究下你的缓冲体系有没有影响物质,一般有氧化还原的东西都不行,BCA原理也是氧化还原,考染的话我很少做,但是个人觉得这方法误差可能大些.另外关键的一点是你所测的蛋白结构不能与牛血清蛋白差太多,差太多就没有意义了.紫外扫描的话是苯环状氨基酸吸收,纯度好的话可以用,建议你两种方法对比研究. |
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