| 查看: 3411 | 回复: 17 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
H-xiangzhu金虫 (正式写手)
|
[求助]
急！PCR产物测序找不到引物 已有1人参与
|
||
| 我想做放线菌的16rDNA鉴定，先提取总DNA，PCR产物直接测序，引物采用细菌通用引物，大小在1500bp这样，但是测序结果发现找不到因为序列，请问我该怎么办呢？是什么问题呢？请高手帮忙。非常感谢！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 测序相关问题 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有223人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 构建载体测序，老在引物区段发生相同的错误，模版有突变？
已经有22人回复
- 关于克隆技术——pcr产物测序问题
已经有16人回复
- 【求助】急~~测序发现在引物位置发现一个碱基缺失
已经有15人回复
- 同源比对设计简并引物PCR产物测序不符！
已经有10人回复
- 求助：PCR扩增片段测序结果引物中间多出150bp的片段
已经有5人回复
- 为何PCR产物测序只测一部分？
已经有9人回复
- 反转录之后PCR扩增片段问题的请教，急急急
已经有5人回复
- PCR产物测序结果
已经有8人回复
- PCR后测序，blast最高匹配度只有32%
已经有3人回复
- PCR最短可以P多少bp，求大家帮我设计引物！
已经有7人回复
- pcr产物测序问题
已经有10人回复
- pcr产物测序和克隆之后重组质粒测序结果一样吗？
已经有12人回复
- 【求助/交流】求PCR二次扩增引物
已经有11人回复
- 【求助/交流】如何对PCR测序产物进行分析？
已经有11人回复
- 【求助/交流】PCR产物测序总是不对
已经有13人回复
- 【求助/交流】测序问题：PCR产物未纯化测序会怎样？
已经有9人回复
- 【求助/交流】测序问题，求助高手。
已经有8人回复
- 【求助/交流】细菌V3区PCR出现问题，引物为357和518，用于DGGE！
已经有8人回复
- 【问题反馈】一对引物扩出来的产物测序后竟然是很多质粒的PCR产物，再怎么区分呢？
已经有10人回复
- 【求助/交流】问个问题,测PCR产物序列的时候会不会测出引物的序列?
已经有16人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
小丹木木: 金币+4, 鼓励 应助 2013-01-05 17:31:36
小丹木木: 金币+4, 鼓励 应助 2013-01-05 17:31:36
|
双向测通是可以的，所得到的序列可信度是可以的，但也有可能没有你想要看到的引物序列（并不代表你的测序结果失败啊）。你最好详细咨询下测序公司的技术支持，把你的需求跟他们讲下。其实测通就是双向测序结果的数据，他们帮忙拼接好。你也可以自己拼接用Chromas来看峰形，用ContigExpress来做拼接。不可靠序列通过看峰形手工切掉。 你只要记住现在DNA测序一个反应也就能测500bp左右。通用引物1492r/F27，pcr后去测序，因为测序软件的自身原因，测出来开头的序列是杂带不准确，如果需要16sRNA的全长，必须做TA克隆，就需要载体。如果你要求鉴定菌种只到属，就没必要克隆了。 你可以选择27F做上游引物，534r做下游引物，PCR一次得到500bp左右的产物，双向测序就能得到前500bp的准确序列了，以此再找一个16srRNA位置在1000左右的引物序列，3个500bp的PCR产物双向测序就能完美的得到你的整条16srRNA序列了。 |
8楼2013-01-05 15:23:48
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2012-12-31 06:14:36
3楼2012-12-31 11:34:09
H-xiangzhu
金虫 (正式写手)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 214.2
- 散金: 10
- 帖子: 470
- 在线: 62.7小时
- 虫号: 1277725
- 注册: 2011-04-25
- 性别: MM
- 专业: 生物防治
4楼2013-01-02 22:03:18
