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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)

应助: 11 (小学生)
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散金: 10
帖子: 470
在线: 62.7小时
虫号: 1277725
注册: 2011-04-25
性别: MM
专业: 生物防治

[求助] 急！PCR产物测序找不到引物已有1人参与

我想做放线菌的16rDNA鉴定，先提取总DNA，PCR产物直接测序，引物采用细菌通用引物，大小在1500bp这样，但是测序结果发现找不到因为序列，请问我该怎么办呢？是什么问题呢？请高手帮忙。非常感谢！

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共同学习，一起进步

1楼2012-12-30 23:49:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

希罗雅

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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红花: 1
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在线: 39.6小时
虫号: 1551608
注册: 2011-12-26
性别: GG
专业: 临床检验新技术

【答案】应助回帖

引用回帖:

6楼: Originally posted by lihongbo840427 at 2013-01-04 15:33:00
你的PCR产物是1500bp的，测序图片的前100bp的峰都不可信，最后面的电泳峰（800bp以后）峰的信噪比比较低，大峰下面套小峰，都不能认为测到的序列。
如果你想在测序结果中找到引物序列（用上游引物测序的话，测序的 ...

现在测序基本上能够保证前800bp是可用的，但是由于刚出峰的几十bp也是不准的，所以或许要测3个反应。

凡事学习

18楼2014-06-03 14:09:39

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