应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助质粒的构建问题
101/1返回列表
查看: 895  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

周志惠

新虫 (小有名气)

[求助] 求助质粒的构建问题

最近在构建质粒，出现了奇怪的问题，连接前跑电泳，载体和片段的大小都是对的，挑转化子，提质粒，质粒的大小是比对照大的，但是在进行酶切验证时，用原来连接的酶进行酶切，发现酶切下来的片段比目的片段小几百bp？想请教这是什么原因？怎么样解决这一问题？（是双酶切）
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-12-30 15:31:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

freerain

禁虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
周志惠: 金币+5, ★有帮助 2012-12-31 13:36:37
本帖内容被屏蔽
2楼2012-12-30 15:48:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
周志惠: 金币+5, ★有帮助 2012-12-31 13:38:29
可能连接的不是你的序列，测序看一下吧，别纠结这个问题了，挑到真的接着做就好了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-30 15:50:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
周志惠: 金币+10, ★有帮助 2012-12-31 13:39:12
有时候片段在胶上看起来会有点小，送样品测序看看吧。当然也有可能是克隆的片段不对。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-12-30 16:08:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by freerain at 2012-12-30 15:48:15
看看内部是不是有酶切位点
或者测序看看序列对不对

谢谢解答哦，关键是实验室不方便测序
赞一下 回复此楼
5楼2012-12-31 13:38:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaodahe at 2012-12-30 15:50:02
可能连接的不是你的序列，测序看一下吧，别纠结这个问题了，挑到真的接着做就好了。

谢谢回答，关键就是挑出来的转化子所连的片段都是比目的片段小的
赞一下 回复此楼
6楼2012-12-31 13:39:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-30 16:08:19
有时候片段在胶上看起来会有点小，送样品测序看看吧。当然也有可能是克隆的片段不对。

7楼2012-12-31 13:39:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 周志惠 at 2012-12-31 13:38:02
谢谢解答哦，关键是实验室不方便测序...

送到公司测序也不贵的。
赞一下 回复此楼
8楼2012-12-31 16:53:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xjtao99

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
9楼2013-01-02 15:03:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by xjtao99 at 2013-01-02 15:03:41
你可以做pcr验证一下，能扩增出来你的目的片段以后再做酶切验证

我现在 是想知道为什么会出现这种情况，这小片段是怎么连上去的
赞一下 回复此楼
10楼2013-01-02 15:30:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 周志惠 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +4 yang婷 2026-03-02 4/200 2026-03-02 14:31 by 向上的胖东
[考博] 诚招农业博士 +3 心欣向荣 2026-02-28 3/150 2026-03-02 13:33 by 时间不狗
[基金申请] 成果系统访问量大，请15分钟后再尝试。由此给您造成的不便，敬请谅解。 +5 xhuama 2026-03-02 5/250 2026-03-02 12:34 by stidwellNK
[考研] 材料工程专硕283求调剂 5+4 ，！？ 2026-03-02 6/300 2026-03-02 11:07 by 黑！在干嘛
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +6 wsl111 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:00 by ydudjddnd
[考研] 264求调剂 +4 巴拉巴拉根556 2026-02-28 4/200 2026-03-02 10:48 by yuchj
[考研] 275求调剂 +3 L-xin? 2026-03-01 6/300 2026-03-02 10:22 by 热情沙漠
[考研] 0856材料调剂 +4 沿岸有贝壳OUC 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:19 by 公瑾逍遥
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭