应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助质粒的构建问题
101/1返回列表
查看: 1089  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

周志惠

新虫 (小有名气)

[求助] 求助质粒的构建问题

最近在构建质粒，出现了奇怪的问题，连接前跑电泳，载体和片段的大小都是对的，挑转化子，提质粒，质粒的大小是比对照大的，但是在进行酶切验证时，用原来连接的酶进行酶切，发现酶切下来的片段比目的片段小几百bp？想请教这是什么原因？怎么样解决这一问题？（是双酶切）
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-12-30 15:31:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

freerain

禁虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
周志惠: 金币+5, ★有帮助 2012-12-31 13:36:37
本帖内容被屏蔽
2楼2012-12-30 15:48:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
周志惠: 金币+5, ★有帮助 2012-12-31 13:38:29
可能连接的不是你的序列，测序看一下吧，别纠结这个问题了，挑到真的接着做就好了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-30 15:50:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
周志惠: 金币+10, ★有帮助 2012-12-31 13:39:12
有时候片段在胶上看起来会有点小，送样品测序看看吧。当然也有可能是克隆的片段不对。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-12-30 16:08:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by freerain at 2012-12-30 15:48:15
看看内部是不是有酶切位点
或者测序看看序列对不对

谢谢解答哦，关键是实验室不方便测序
赞一下 回复此楼
5楼2012-12-31 13:38:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaodahe at 2012-12-30 15:50:02
可能连接的不是你的序列，测序看一下吧，别纠结这个问题了，挑到真的接着做就好了。

谢谢回答，关键就是挑出来的转化子所连的片段都是比目的片段小的
赞一下 回复此楼
6楼2012-12-31 13:39:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-30 16:08:19
有时候片段在胶上看起来会有点小，送样品测序看看吧。当然也有可能是克隆的片段不对。

7楼2012-12-31 13:39:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 周志惠 at 2012-12-31 13:38:02
谢谢解答哦，关键是实验室不方便测序...

送到公司测序也不贵的。
赞一下 回复此楼
8楼2012-12-31 16:53:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xjtao99

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
9楼2013-01-02 15:03:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周志惠

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by xjtao99 at 2013-01-02 15:03:41
你可以做pcr验证一下，能扩增出来你的目的片段以后再做酶切验证

我现在 是想知道为什么会出现这种情况，这小片段是怎么连上去的
赞一下 回复此楼
10楼2013-01-02 15:30:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 周志惠 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:17 by ZPa0EcMwuECS
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 06:13 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 05:48 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 11/550 2026-08-30 05:40 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 03:26 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 3/150 2026-08-30 02:29 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:47 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:45 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 01:12 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭