应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pcr的温度及时间的选择
51/1返回列表
查看: 3340  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

贝壳v下了

铜虫 (初入文坛)

[求助] pcr的温度及时间的选择

各位大侠，水稻叶片的DNA做pcr的一些问题。我的片段长度是600至800bp的样子   1、请问变性温度，退火温度，延伸温度是多少 ？  2、请问变性时间，退火时间，延伸时间是多久？  3、请问应跑多少个循环比较合适，还有第一个步骤的温度和时间是怎样的，以及最后一个步骤的温度及时间是怎样的  4、在跑电泳时电压，电流，功率，及时间怎样才合适，我跑的是聚丙烯酰胺凝胶电泳。
望请各位大侠多多指教，感激不尽。
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

贝壳v下了

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
专心科研
1楼 2012-11-30 08:15:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongzifan812

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

一般都是要看你的酶 的说明书，现在国内试剂公司都在说明书里注明了温度，对应1Kb的延伸时间，不一样的酶自然就不一样
赞一下 回复此楼
9楼2013-02-19 00:02:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
……变性温度一般94或者95，退火这个没办法回答你，看你的引物，延伸温度72，相关的时间你随便找一篇文献都有吧…………冒昧的说，我觉得你问的这些东西随便搜搜就有了……
赞一下(1人) 回复此楼
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
2楼2012-11-30 09:49:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czdaeq

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的问题太多了
这到底是你的实验，还是俺们的实验？！
我这先回答你第一个问题：
变性温度一般是95°-98°（查生化书、基因工程操作原理等书可知）；退火温度、延生温度，看你用的酶的说明书，可知。
赞一下 回复此楼
3楼2012-11-30 10:20:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
退火温度得看 引物上面的Tm-5度，一般都是25到40个循环
赞一下 回复此楼
4楼2012-11-30 10:25:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭