| 查看: 5145 | 回复: 20 | |||
简单HE认真木虫 (小有名气)
|
[求助]
包涵体蛋白纯化不溶解，怎麽办？ 已有2人参与
|
||
| 菌体定位后，目的蛋白在沉淀中，即包涵体表达，但是包含体没办法溶解，请教一下各位该怎麽办?顺便问一下，可否加一点表变活性剂或乙醇以增加疏水性蛋白的溶解... |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 实验求助 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有233人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 纯化包涵体所用的含有尿素的溶液如何保存
已经有8人回复
- 药品不纯，但是溶解性太差，该怎么提纯？？
已经有9人回复
- 交流：包涵体纯化 细菌裂解液配方
已经有17人回复
- GST包涵体蛋白复性后挂不上柱子，急急急~~
已经有7人回复
- 溶解包涵体究竟给多少浓度的DTT？
已经有5人回复
- 样品的纯化过程中发现溶解性太差，进一步纯化怎么办？
已经有6人回复
- 目的蛋白表达纯化，求教高手
已经有12人回复
- 包涵体稀释复性是不是会好点啊？
已经有5人回复
- 原核表达蛋白纯化
已经有32人回复
- 只溶解铝不溶解氧化铝
已经有9人回复
- 乳清分离蛋白溶解后有沉淀
已经有7人回复
- 巯基乙醇可以溶解蛋白吗
已经有3人回复
- 包涵体复性试剂盒
已经有7人回复
- 关于重组蛋白包涵体的溶解及复性
已经有5人回复
- 茶多酚用水溶解后总酚一直减少，用酒精溶解有不溶物
已经有9人回复
- 高效液相纯化包涵体蛋白
已经有4人回复
- 重组蛋白是包涵体怎么溶
已经有42人回复
- 原核表达形成了包涵体怎么办啊？
已经有22人回复
- 包涵体蛋白纯化
已经有1人回复
- 求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
已经有17人回复
- 包涵体洗涤后8M尿素不溶解
已经有7人回复
xiongyaoling
金虫 (小有名气)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 1056.2
- 散金: 50
- 红花: 1
- 帖子: 109
- 在线: 33小时
- 虫号: 1267368
- 注册: 2011-04-16
- 性别: MM
- 专业: 蛋白质组学
3楼2012-08-18 18:36:31
jackenmickey
禁虫 (正式写手)
|
本帖内容被屏蔽 |
15楼2012-08-23 13:12:44
【答案】应助回帖
| 小MM，6MGuaHCl和8MUrea都可以溶解包涵体，而且都是可以过His柱的，你是从哪里听说他俩不能上His柱呢？而且GuaHCl增溶效果更好，过柱效果也好，因为本身是高盐可以防止非特异性吸附。你的包涵体最好先用1%triton，50mMTris，50mMnaCl，pH8.0去超声洗涤一下包涵体，然后离心沉淀再用50mMTris，6MGuaHCl，1mMDTT（5mMβ-ME）搅拌增溶3h即可，直接上His柱就行。DTT可以选择性添加，而且浓度不能高，否则不能过his柱会把Ni还原掉。如果搅拌增溶不行可以试试超声，基本不会有哪种包涵体连超声都无法增溶的，祝你好运。 |
17楼2012-08-23 16:49:17
会思想的芦苇
金虫 (正式写手)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 1415.8
- 红花: 2
- 帖子: 360
- 在线: 166.2小时
- 虫号: 1360621
- 注册: 2011-08-04
- 专业: 生物技术药物
2楼2012-08-18 16:56:27
xuyihui2001
银虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 594.7
- 散金: 17
- 红花: 2
- 帖子: 369
- 在线: 79.1小时
- 虫号: 1077344
- 注册: 2010-08-19
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2012-08-19 09:16:09
简单HE认真
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1706.2
- 散金: 32
- 红花: 3
- 帖子: 74
- 在线: 44.8小时
- 虫号: 1905190
- 注册: 2012-07-22
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
5楼2012-08-19 14:02:33
简单HE认真
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1706.2
- 散金: 32
- 红花: 3
- 帖子: 74
- 在线: 44.8小时
- 虫号: 1905190
- 注册: 2012-07-22
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
6楼2012-08-19 14:10:46
7楼2012-08-20 11:06:26
gelois
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 2
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 6015.3
- 红花: 2
- 帖子: 375
- 在线: 149.6小时
- 虫号: 1655503
- 注册: 2012-03-01
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2012-08-20 11:15:08
9楼2012-08-20 11:48:11
简单HE认真
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1706.2
- 散金: 32
- 红花: 3
- 帖子: 74
- 在线: 44.8小时
- 虫号: 1905190
- 注册: 2012-07-22
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
10楼2012-08-20 14:45:46
20