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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 师兄师姐们帮忙看一下pUC19重组质粒酶切电泳结果
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hnusty

金虫 (正式写手)

[求助] 师兄师姐们帮忙看一下pUC19重组质粒酶切电泳结果

前几天做的分子实验的，具体过程是手工从E.COLI中提取了pUC19质粒，酶切后与老师提供λDNA进行连接，导入到了amp(-)的E.COLI中，培养后用麦康凯培养基筛选白色菌落后用试剂盒提取质粒DNA，酶切，琼脂糖电泳。图片是电泳结果。每两泳道算一大组（依次是酶切质粒DNA、重组DNA）共六大组， 最后一组是λDNA酶切对照
求师兄师姐分析一下是不1、3大组才说明重组成功了呢？最后一组是什么情况啊
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1楼 2011-11-18 23:11:22
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scienzyme

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

电泳时一定要加空载体对照，看看重组质粒是不是比空载体滞后。
酶切时也要有一个空载体酶切的对照。
另外，插入片段有多长？
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2楼2011-11-19 20:55:09
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hnusty

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by scienzyme at 2011-11-19 20:55:09:
电泳时一定要加空载体对照，看看重组质粒是不是比空载体滞后。
酶切时也要有一个空载体酶切的对照。
另外，插入片段有多长？

哦 下回注意空载体对照 先前跑过一个空载体的 后面就忘给加了 插入片段就是λdna/hindⅢ酶切的片段 随机插入的 期间质粒也没CIP处理 所以结果都不大一样 条带拖尾，模糊不清是什么原因造成的啊
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3楼2011-11-20 13:49:35
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