应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白表达问题
61/1返回列表
查看: 719  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看

backsunboy

木虫 (正式写手)

[交流] 蛋白表达问题 已有4人参与

各位同仁：
    小弟最近做原核表达，目的蛋白预测为50KDa，用的是pGEX-4T-2原核表达载体，上面有GST（26KDa）标签，表达条件为28度，IPTG终浓度为1mM，诱导时间16小时，经检测蛋白以包涵体形式存在，但是我想要可溶性的蛋白，希望各位能给点建设性建议，小弟不胜感激。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-19 10:34:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doublehelix

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+3, BioEPI+1): 把原理说出来就好了 2011-11-02 08:18:49
1:诱导温度可适当 再降一下，如25度
2：IPTG浓度降下来，如0.2
3：IPTG时OD0.8-1.0加
4：摇床转速降下来，如减半
试试吧，应该会有效果
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-10-19 11:29:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yidC423R

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
silicare(金币+2): all means=？ 2011-11-02 08:19:31
Not sure whether you can do that. If you can, slow down the expression by all means may help.

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-10-20 07:57:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zc10052157

新虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
楼上说的很全面   以前做过16°的   

不过有些蛋白表达是基因本身的问题没有办法在原核系统里可溶表达

希望你改变条件能做出来
赞一下(1人) 回复此楼
hold住
4楼2011-10-20 09:16:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

backsunboy

木虫 (正式写手)
谢谢大家的建议，我试试
赞一下 回复此楼
5楼2011-10-20 09:40:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ffffffffwhh

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
为什么诱导16个小时这么久呢？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
6楼2015-01-12 09:05:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 backsunboy 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭