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银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】关于内参

想验证一个应该在根部特异性表达的基因在茎和叶中是否有表达，提取了RNA，OD测定260/280 1.8, 260/230 1.28，结果虽然不好但是不愿意再提了，太墨迹，就拿这个反转了，用β-actin做引物试了一下有带，就拿这个模板去P了。跑完一看以为不表达的目的基因跑出来了，原本想用来做阳性对照的β-actin却没跑出来，这是怎么回事呢？主要不懂为什么同样的条件下原本能出的β-actin不出，体系和退火温度是完全一样的，加进去的模板量也是一样的。
另外那位大侠指点一下260/230 值如果过低，像1.28这样的结果会对反转产生一些什么样的影响？

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1楼 2011-03-07 16:11:01

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7788945

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by cjl2fl at 2011-03-08 17:09:20:
我以前遇到类似的问题，换了下BUffer，有效果。不知是否有参考意义？

试试吧，不过应该不是这个原因

赞一下

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7楼2011-03-08 19:46:42

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shihongling

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7788945(金币+1): 2011-03-07 16:56:28

引用回帖:

Originally posted by 7788945 at 2011-03-07 16:11:01:
想验证一个应该在根部特异性表达的基因在茎和叶中是否有表达，提取了RNA，OD测定260/280 1.8, 260/230 1.28，结果虽然不好但是不愿意再提了，太墨迹，就拿这个反转了，用β-actin做引物试了一下有带，就拿这个模板 ...

同问！顶！

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2楼2011-03-07 16:35:18

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