24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1361  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

7788945

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】关于内参

想验证一个应该在根部特异性表达的基因在茎和叶中是否有表达,提取了RNA,OD测定260/280 1.8, 260/230 1.28,结果虽然不好但是不愿意再提了,太墨迹,就拿这个反转了,用β-actin做引物试了一下有带,就拿这个模板去P了。跑完一看以为不表达的目的基因跑出来了,原本想用来做阳性对照的β-actin却没跑出来,这是怎么回事呢?主要不懂为什么同样的条件下原本能出的β-actin不出,体系和退火温度是完全一样的,加进去的模板量也是一样的。
另外那位大侠指点一下260/230 值如果过低,像1.28这样的结果会对反转产生一些什么样的影响?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjl2fl

金虫 (正式写手)


7788945(金币+1): 2011-03-09 09:40:45
我以前遇到类似的问题,换了下BUffer,有效果。不知是否有参考意义?
5楼2011-03-08 17:09:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

shihongling

金虫 (小有名气)


7788945(金币+1): 2011-03-07 16:56:28
引用回帖:
Originally posted by 7788945 at 2011-03-07 16:11:01:
想验证一个应该在根部特异性表达的基因在茎和叶中是否有表达,提取了RNA,OD测定260/280 1.8, 260/230 1.28,结果虽然不好但是不愿意再提了,太墨迹,就拿这个反转了,用β-actin做引物试了一下有带,就拿这个模板 ...

同问!顶!
2楼2011-03-07 16:35:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjl2fl

金虫 (正式写手)



7788945(金币+1):谢谢参与
7788945(金币+1): 2011-03-09 09:40:34
不同的组织,引物有差异的吧。。。
是不是对照的问题?
3楼2011-03-07 17:13:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

7788945

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by cjl2fl at 2011-03-07 17:13:09:
不同的组织,引物有差异的吧。。。
是不是对照的问题?

不是组织的毛病,问题是前一次能P出来的内参到了第二次P不出来,用的模板、体系、退火温度等条件都一样,第二次没有,不是说这个内参在别的组织里没有
4楼2011-03-08 15:59:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 332求调剂 +14 蕉蕉123 2026-04-10 14/700 2026-04-12 00:27 by 蓝云思雨
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 本人女孩 +7 吼吼, 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 22408 352分求调剂 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:42 by maddjdld
[考研] 材料与化工调剂 10+11 下一站上岸@ 2026-04-10 36/1800 2026-04-11 10:26 by 89436494
[考研] 材料与化工调剂 +12 否极泰来2026 2026-04-10 13/650 2026-04-11 00:28 by wangjihu
[考研] 材料085601调剂 +25 何润采123 2026-04-10 27/1350 2026-04-10 23:17 by Ftglcn90
[硕博家园] 0856材料化工求调剂,一志愿211,初试成绩349 +5 江淮北月 2026-04-05 5/250 2026-04-10 16:26 by 高维春
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 292求调剂 +9 笑笑袁 2026-04-09 9/450 2026-04-10 10:05 by LHGeng
[考研] 一志愿双非085400电子信息344 求调剂,对材料和化学方向也感兴趣 +8 无情的小羊 2026-04-09 9/450 2026-04-10 09:30 by 松花缸1201
[考研] 初试分332,一志愿报考西北工业大学, +11 故人?? 2026-04-09 11/550 2026-04-09 21:54 by JineShine
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +24 额cc 2026-04-06 25/1250 2026-04-09 16:01 by wp06
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +11 emokidd 2026-04-08 12/600 2026-04-09 09:24 by wyf236
[考研] 一志愿985初试354分生物调剂 +3 031001 2026-04-06 3/150 2026-04-09 00:30 by Evan_Liu
[考研] 316求调剂 +7 yyx想调剂 2026-04-05 7/350 2026-04-07 14:31 by shdgaomin
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
[考研] 一志愿武汉理工大学080200机械工程308分,求调剂 +4 终不似从前 2026-04-05 4/200 2026-04-06 11:46 by 考研学校招点人
[考研] 331求调剂 +8 于征yz 2026-04-05 8/400 2026-04-06 00:54 by fmesaito
[考研] 348求调剂 +3 车厘子zzz 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:30 by 啵啵啵0119
信息提示
请填处理意见