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xu19850927

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR产物测序出现杂峰过多的问题

求助各位高手,我做的是扩增人外周血DNA片段,用宝生物的PCR试剂,电泳图显示扩增结果良好,但老师说测序结果全是杂峰和重峰,根本没法读序列,快急死了,请问可能的原因都有哪些?另外我不懂测序图谱怎么读,比如怎样是突变,哪位高手能发给我篇关于测序图谱的文章,小弟不胜感激!
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超然渡陈

金虫 (小有名气)

四是,产物含有高GC,但是测序的时候没有给公司注明。公司测序的时候是按普通条件测序,这样在GC区就会出现大量杂峰。
8楼2012-04-09 15:27:17
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sherry01130

木虫 (著名写手)

我也面临了同样的问题。
我猜是你的PCR不好。。。
2楼2010-11-19 17:06:43
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


lstt09nk(金币+1):最近很活跃 2010-11-19 17:39:57
连T载体测得么还是直接测得?

莫非GC含量较高?
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2010-11-19 17:08:37
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~!

模板污染,重叠的话应该是有模板污染吧,建议克隆测序~~~
4楼2010-11-19 17:13:31
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