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maxwell1988金虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】关于PCR产物的突变 已有4人参与
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我是个刚进入分子克隆实验的菜鸟。前段时间刚从外周血细胞中提取了其总RNA，再进行RT-PCR逆转录成cDNA。以该cDNA作为模板，进行常规的PCR。之后就是简单的割胶回收，TA克隆。 送去测序后，连续几次得到的结果都是在目的基因序列的3'端大概9个碱基处，多了一个同样的一个碱基。 如果是突变，那么为什么会在同样的地方出现同样的情况？如果是模板的问题，为什么以该模板做的其他PCR产物拿去测序却完全正确？会不会是TA克隆出了什么问题？请高手们多多指教！  |
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7楼2010-12-06 15:27:40
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