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maxwell1988

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于PCR产物的突变 已有4人参与

我是个刚进入分子克隆实验的菜鸟。前段时间刚从外周血细胞中提取了其总RNA,再进行RT-PCR逆转录成cDNA。以该cDNA作为模板,进行常规的PCR。之后就是简单的割胶回收,TA克隆。
   送去测序后,连续几次得到的结果都是在目的基因序列的3'端大概9个碱基处,多了一个同样的一个碱基。
   如果是突变,那么为什么会在同样的地方出现同样的情况?如果是模板的问题,为什么以该模板做的其他PCR产物拿去测序却完全正确?会不会是TA克隆出了什么问题?请高手们多多指教!
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perfectpig向前冲!别犹豫!
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ben1147

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
靠末端那么近,多个克隆又都一样,是不是引物上的突变啊
3楼2010-12-06 12:22:20
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