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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR产物测序出现杂峰过多的问题
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xu19850927

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR产物测序出现杂峰过多的问题

求助各位高手，我做的是扩增人外周血DNA片段，用宝生物的PCR试剂，电泳图显示扩增结果良好，但老师说测序结果全是杂峰和重峰，根本没法读序列，快急死了，请问可能的原因都有哪些？另外我不懂测序图谱怎么读，比如怎样是突变，哪位高手能发给我篇关于测序图谱的文章，小弟不胜感激！
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1楼 2010-11-03 15:51:10
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2393103楼: Originally posted by wininghe at 2012-04-08 14:10:03:
是指被什么污染？

有可能是多拷贝的片段，或者DNA不纯。。克隆一般就好了
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6楼2012-04-08 20:41:15
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查看全部 8 个回答

sherry01130

木虫 (著名写手)
我也面临了同样的问题。
我猜是你的PCR不好。。。
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2楼2010-11-19 17:06:43
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
lstt09nk(金币+1):最近很活跃 2010-11-19 17:39:57
连T载体测得么还是直接测得？

莫非GC含量较高？
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2010-11-19 17:08:37
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
模板污染，重叠的话应该是有模板污染吧，建议克隆测序~~~
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-11-19 17:13:31
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