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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR以前能出来目的条带，现在一直弥散，诸位帮忙分析一下
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小园丁

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR以前能出来目的条带，现在一直弥散，诸位帮忙分析一下 已有4人参与

请教诸位高手：
我做RT-PCR，前几天还能扩增出目的条带，虽然很弱，但第二天用同一管的cDNA和相同条件PCR后，仅能在目的条带以下的区域出现弥散。我的目的条带1.6K左右，弥散后，弥散的中心为800左右，100-1.5K之间都有。但就是没有目的条带。之后又重新PCR了N次，均为弥散。期间也重新换过cDNA模板。但均无效，诸位高手帮忙分析一下，谢谢！
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阿弥陀佛
1楼 2010-09-24 19:26:35
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bigboy123

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
RT-PCR的模板要现用现提，不要反复冻融，应该就没事了。是不是你的cDNA降解了吧。
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供应PCR增量剂
2楼2010-09-24 21:14:56
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figo.339

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
cDNA应该没问题吧。
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3楼2010-09-24 22:16:35
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
内参呢？
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4楼2010-09-24 22:17:25
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shizishanshang

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
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silicare(金币+1):这种概率是最大的！ 2010-09-25 08:30:00
也可能是引物降解了
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5楼2010-09-24 23:08:58
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