24小时热门版块排行榜    

查看: 1535  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhtongshi

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR求助

pcr实验
    做总DNA的PCR时,第一次能成功的做出来,而且做得非常好,但接下来再怎么做都失败。非常着急,请高人指点!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cxb-abc

银虫 (小有名气)

zhtongshi(金币+1): 2010-09-28 09:26:34
所双蒸水,枪头,灭菌再用,可能你的加样有问题吧! DNA没问题,下游试验就考虑引物,酶,dNTPS等
4楼2010-09-23 16:49:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

qiangfeng

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5):欢迎分享经验! 2010-09-23 19:02:22
zhtongshi(金币+1): 2010-09-28 09:26:24
我认为原因主要有两个:
1. 你第一次成功可能是总DNA提取后就立即做PCR,这时总DNA是完整的,
总DNA放一段时间后,总DNA已降解或受到损伤,使目的基因无法获得
2. 可能是你做PCR时用到的试剂出问题了,可以换用新试剂试试
另外,再问一下,你是用什么试剂提取的总DNA?
PCR时,都用的哪些公司的试剂?
顺势而行,问心无愧!
2楼2010-09-23 10:31:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixg

铁杆木虫 (正式写手)

提取DNA后最好在4度放置,以避免反复冻融引起DNA降解。
3楼2010-09-23 13:44:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
引用回帖:
Originally posted by cxb-abc at 2010-09-23 16:49:40:
所双蒸水,枪头,灭菌再用,可能你的加样有问题吧! DNA没问题,下游试验就考虑引物,酶,dNTPS等

支持你
5楼2010-09-23 17:15:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +7 炎黄贵胄 2026-08-22 8/400 2026-08-25 08:48 by ZJTJZ
[基金申请] 我面上完蛋了 +12 且听虎啸 2026-08-20 13/650 2026-08-25 08:42 by 绘中天
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见