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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR 反应
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jiahaitao1016

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR 反应 已有8人参与

请问扩增100-200bp的片段的PCR反应条件一般是怎样？谢谢
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1楼 2010-07-01 11:03:33
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yangjunzju

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
94度变性，退火温度根据你的引物TM值减5度。。。延伸十分钟！
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2楼2010-07-01 11:22:25
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diaoyuhua

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
文献有很多，随便找个都行，一般条件
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3楼2010-07-01 11:36:18
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):good 2010-07-01 12:42:11
94  5min
94   30S
退火温度自己确定，30S
72   15S
30-40个循环
72  10 min
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4楼2010-07-01 12:19:22
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):正解~~~ 2010-07-01 12:42:00
跟一般反应的程序一样，不过延伸时间短一些，1min！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
5楼2010-07-01 12:22:00
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yu15742837

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
多看多想。
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6楼2010-07-01 12:33:42
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励交流 2010-07-01 16:07:49
引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-07-01 11:22:25:
94度变性，退火温度根据你的引物TM值减5度。。。延伸十分钟！

退火温度怎么能这么长？一般的Taq酶扩增效率大约1500bp/min，可以作为延伸时间的参考。如果不放心的话，可以适当延长一点，但延长太多对结果并没有好处。
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
7楼2010-07-01 16:00:52
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mark32280667

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
100-200bp，

还要10min，日哦，

10s足够了。
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8楼2010-07-01 16:09:24
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justmaxim

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
受教了。
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9楼2010-07-01 16:27:37
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