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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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jiahaitao1016

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR 反应 已有8人参与

请问扩增100-200bp的片段的PCR反应条件一般是怎样?谢谢
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yangjunzju

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
94度变性,退火温度根据你的引物TM值减5度。。。延伸十分钟!
2楼2010-07-01 11:22:25
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diaoyuhua

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
文献有很多,随便找个都行,一般条件
3楼2010-07-01 11:36:18
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小猫三两只

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):good 2010-07-01 12:42:11
94  5min
94   30S
退火温度自己确定,30S
72   15S
30-40个循环
72  10 min
4楼2010-07-01 12:19:22
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):正解~~~ 2010-07-01 12:42:00
跟一般反应的程序一样,不过延伸时间短一些,1min!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
5楼2010-07-01 12:22:00
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yu15742837

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
多看多想。
6楼2010-07-01 12:33:42
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励交流 2010-07-01 16:07:49
引用回帖:
Originally posted by yangjunzju at 2010-07-01 11:22:25:
94度变性,退火温度根据你的引物TM值减5度。。。延伸十分钟!

退火温度怎么能这么长?一般的Taq酶扩增效率大约1500bp/min,可以作为延伸时间的参考。如果不放心的话,可以适当延长一点,但延长太多对结果并没有好处。
我有一个梦想,我梦想有一天,我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力,居住在自己愿意居住的地方。
7楼2010-07-01 16:00:52
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mark32280667

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
100-200bp,

还要10min,日哦,

10s足够了。
8楼2010-07-01 16:09:24
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justmaxim

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
受教了。
9楼2010-07-01 16:27:37
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