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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR
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guanjinke

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR 已有5人参与

给位学长：我做的PCR一共有两对引物，一对对两个样品（肌肉和皮张）DNA都能扩出来，一对对皮张提的DNA 做时扩不出来，但对肌肉样品能扩出来。请问这是怎么回事？
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1楼 2011-04-17 11:11:49
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是楼主的肌肉样品DNA有问题！
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jiayoubashaonian
2楼2011-04-17 15:10:38
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励发帖应助。 2011-04-17 19:14:09
引用回帖:
Originally posted by guanjinke at 2011-04-17 11:11:49:
给位学长：我做的PCR一共有两对引物，一对对两个样品（肌肉和皮张）DNA都能扩出来，一对对皮张提的DNA 做时扩不出来，但对肌肉样品能扩出来。请问这是怎么回事？

能对肌肉组织DNA能P出来的引物
不能对皮张DNA P出来
是这个意思吧
出现这种情况的可能性有几种：
1.在P皮张的时候PCR体系出问题了
可以重复确认一下这个体系的各个环节确实没问题
2.模板DNA是基因组DNA还是cDNA
如果是cDNA的话有可能这个基因不在皮张里表达
所以就没有RNA自然就没有cDNA，自然就P不出来了
3.这对引物可能确实P不出来特异性目的条带
但是在肌肉细胞中，它可以可以和其他基因结合从而P出来非特异性带
这个也很好检测，可以检测一下
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
3楼2011-04-17 17:37:28
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guanjinke

银虫 (小有名气)
谢谢！是基因组DNA.
3.这对引物可能确实P不出来特异性目的条带
但是在肌肉细胞中，它可以可以和其他基因结合从而P出来非特异性带
这个也很好检测，可以检测一下 .
这个怎么检测啊？
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4楼2011-04-17 21:50:06
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by guanjinke at 2011-04-17 21:50:06:
谢谢！是基因组DNA.
3.这对引物可能确实P不出来特异性目的条带
但是在肌肉细胞中，它可以可以和其他基因结合从而P出来非特异性带
这个也很好检测，可以检测一下 .
这个怎 ...

简单
看条带大小对不啦
要是分子量大小也对的话
那就用引物做一下基因组Blast
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
5楼2011-04-18 09:22:35
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竹林风2012

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我也是学生物类的，但我也是不是很清楚
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同天下好友一起交流
6楼2011-04-19 18:13:43
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daisy928

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我做过PCR，但是是做总的DNA。。。。这个不太懂
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7楼2011-04-21 13:51:58
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