应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】pcr
61/1返回列表
查看: 956  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jackiechan

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】pcr 已有5人参与

请根据照片帮忙分析pcr失败原因，目的片断是1800 bp,用的是上海生工taq酶,谢谢


[ Last edited by jackiechan on 2010-5-18 at 16:45 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-05-18 16:44:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)
★
1949stone(金币+1):同意 2010-05-18 18:22:27
最好把体系各成分用量也列出来,然后退火或引物的Tm大家可能帮你解决更清晰
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-05-18 18:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

christina1213

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-18 22:26:47
把你的体系，目的带的大小和有相关信息列下（比如GC含量之类的），不然看图真看不出什么，如果是底下的那两条带，可以多加些模板，或者加5%-10%的DMSO试试，可能会改观下
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-05-18 18:56:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaiyf

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-18 22:26:51
出现上述情况的原因可能有以下几个方面：1、酶量过多。2 酶的质量差 3 dNTP浓度过高。 4 Mg离子浓度过高。 5退火温度过低。6 循环次数过多。 7 模板质量差，有蛋白质等杂质影响。
具体什么愿意楼主自己在仔细查一下吧
赞一下(2人) 回复此楼
多看文献，多学知识
4楼2010-05-18 20:16:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫虫博士

新虫 (小有名气)
★
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-18 22:26:55
没有扩增迹象，但是可以看出，你的酶系统是没有问题的，关键是你的引物不能结合到模板上或者此酶不适合这种长片段的扩增。建议先换更好的酶，如果不能扩，就考虑引物。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-05-18 21:17:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiechan

木虫 (小有名气)

基因组和pcr条件





模版不是图片上的用量,模版是稀释200 400 800倍各1微升,分别对应图片上的1、0.5、0.25
酶1微升
mg++用的是25mm的那种
引物各1微升
50微升体系
各2个平行
目的条带应该是1800bp
大肠杆菌基因组是自己提的，没用试剂盒，不只是否有蛋白质等杂志污染而影响pcr，如果有蛋白质是否应该流在点样孔，而我的点样孔不亮

[ Last edited by jackiechan on 2010-5-18 at 21:53 ]
赞一下 回复此楼
6楼2010-05-18 21:33:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jackiechan 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 321求调剂 +3 何润采123 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:27 by li123456789.
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +4 1孙悟空 2026-03-17 4/200 2026-03-18 17:59 by fivewind
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 材料，纺织，生物（0856、0710），化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 265求调剂 +3 梁梁校校 2026-03-17 3/150 2026-03-18 09:12 by zhukairuo
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 材料与化工专硕调剂 +5 heming3743 2026-03-16 5/250 2026-03-17 14:03 by 勇敢太监王公公
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 土木第一志愿276求调剂，科研和技能十分丰富，求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。，。，。，。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭