【答案】应助回帖

zhougama

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2楼2011-07-06 15:39:50

qhuzhl

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你可以根据你的离子浓度等情况用软件算下退火温度，做个梯度.

3楼2011-07-06 15:40:52

love_st

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【答案】应助回帖

zhougama(金币+5): 2011-07-07 09:01:23
zhougama(金币+1): 2011-07-07 12:40:35
zhougama(金币+10): 非常感谢你，果然是dNTPs的浓度问题，今天稀释之后进行了PCR，结果P出条带了。 2011-07-07 19:41:28

你这dNTPs的浓度不对吧

4楼2011-07-06 16:23:02

rb

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【答案】应助回帖

zhougama(金币+3): 2011-07-07 09:01:30
zhougama(金币+1): 2011-07-07 12:40:41

做一个touchdown吧。你没给反应温度，这个很重要：）

寝室楼的大爷、大妈都是哲学家，他们每天都在思考人类最根本的三个问题：你是谁？你从哪儿来？要去哪儿？

5楼2011-07-06 16:45:06

zhougama

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6楼2011-07-06 17:30:29

zhougama

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7楼2011-07-06 17:33:22

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8楼2011-07-06 17:34:48

qhuzhl

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引用回帖:

Originally posted by zhougama at 2011-07-06 17:30:29:
这个离子浓度会影响退火温度吗？这个我就不了解了，不知道一般要用什么软件来计算？

oligo 7可以算，ABI公司的一款工具好像也行，这是网址： https://www2.appliedbiosystems.c ... s/tm_calculator.cfm

9楼2011-07-06 19:05:54

sweetcrystal

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dNTPs你都用到5mM了还没有问题》？

10楼2011-07-06 21:36:54