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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR问题
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xpb2005

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR问题已有8人参与

我提取转基因植株的DNA，做PCR检测有没有目的基因，但P出来后老感觉目的带和阳性质粒P出来的不在一条线上，请各位虫友讨论讨论。





最右边是阳性对照，
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1楼2010-04-30 16:00:48
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还行吧，大小差的不多啊
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2楼2010-04-30 22:07:27
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miya173

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-01 22:12
转入的是外源基因还是植物本身的基因，有没有阴性对照，模板DNA的浓度有没有控制？
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3楼2010-04-30 22:28:01
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jiwu20

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
估计不是相同的片段
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4楼2010-05-01 11:01:04
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xpb2005

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by miya173 at 2010-04-30 22:28:01:
转入的是外源基因还是植物本身的基因，有没有阴性对照，模板DNA的浓度有没有控制？

浓度没测过
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5楼2010-05-01 13:40:53
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wlihust

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议做个阴性对照
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6楼2010-05-01 18:03:58
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xpb2005

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wlihust at 2010-05-01 18:03:58:
建议做个阴性对照

这个阴性对照怎么做？能说说嘛，谢谢了
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7楼2010-05-01 19:06:49
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jiangkuo0520

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
plantaqp(金币+1):欢迎发表自己的观点 2010-05-02 23:30
引用回帖:
Originally posted by xpb2005 at 2010-05-01 19:06:49:



这个阴性对照怎么做？能说说嘛，谢谢了

模板的量换成DDH2O就OK了，其他的正常加，正常情况下除了引物2聚体不会出现特异条带
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8楼2010-05-02 08:57:35
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临风7071

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
plantaqp(金币+1):欢迎发表自己的观点 2010-05-02 23:30
引用回帖:
Originally posted by jiangkuo0520 at 2010-05-02 08:57:35:

模板的量换成DDH2O就OK了，其他的正常加，正常情况下除了引物2聚体不会出现特异条带

楼上说的是不对的，对照应该用没有目的基因的载体作为模板去P
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9楼2010-05-02 23:14:00
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plantaqp

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 临风7071 at 2010-05-02 23:14:00:

楼上说的是不对的，对照应该用没有目的基因的载体作为模板去P

严格意义上两个阴性对照都要的。
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10楼2010-05-02 23:34:06
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