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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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Allanflying

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】pcr求解 已有11人参与

引物和模板都没问题,PCR体系和条件都没问题,Taq酶选择没问题,但操作没有在冰上进行(常温),重复好多次PCR,都没有我想要的条带只出来引物二聚体,是不是可能Taq酶变性了导致的?哪位大哥大姐指点一下吧。

[ Last edited by Allanflying on 2010-11-5 at 19:34 ]
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hnndpt

铁虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
按你描述这情况,应该没问题
2楼2010-11-05 19:42:52
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那你怎么确定引物没问题啊?你引物设计的不好嘛。
3楼2010-11-05 19:56:31
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langduiyue

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们一直是在常温完全没有问题。  估计其他地方有问题  建议LZ再看一下
角逐自我
4楼2010-11-05 20:35:37
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云横秦岭

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
自习查找原因,总有疏忽的。
5楼2010-11-05 20:49:53
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不时你加样用问题啊?
6楼2010-11-05 21:06:23
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风中摇曳

木虫 (正式写手)

热爱科学

那你就换管新买的taq酶试试,最好是换对引物。估计引物不好
scienceisnature
7楼2010-11-07 10:27:09
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
模板稀释一点,Mg2+多加一点。
8楼2010-11-07 15:38:18
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吓猴蹲

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你说的情况太含糊,你具体想扩什么,我想如果引物没有问题,那么你的模板有没有问题,因为如果是P基因组很难说的,最好换个模板,如果是CDNA,那么我想引物你说没有问题,退火温度你确定没有问题过没,还有你可以试试换一管酶试试。不知道你的具体情况,不好分析
一分一分,省到结婚
9楼2010-11-07 16:15:19
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heroyl

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果客官各方面都没问题那就是主观问题了!
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
10楼2010-11-07 18:24:14
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