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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】pcr求解
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Allanflying

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】pcr求解 已有11人参与

引物和模板都没问题，PCR体系和条件都没问题，Taq酶选择没问题，但操作没有在冰上进行（常温），重复好多次PCR，都没有我想要的条带只出来引物二聚体，是不是可能Taq酶变性了导致的？哪位大哥大姐指点一下吧。

[ Last edited by Allanflying on 2010-11-5 at 19:34 ]
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1楼 2010-11-05 19:31:32
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hnndpt

铁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
按你描述这情况，应该没问题
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2楼2010-11-05 19:42:52
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
那你怎么确定引物没问题啊？你引物设计的不好嘛。
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3楼2010-11-05 19:56:31
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langduiyue

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们一直是在常温完全没有问题。  估计其他地方有问题  建议LZ再看一下
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角逐自我
4楼2010-11-05 20:35:37
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云横秦岭

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
自习查找原因，总有疏忽的。
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5楼2010-11-05 20:49:53
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不时你加样用问题啊？
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6楼2010-11-05 21:06:23
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风中摇曳

木虫 (正式写手)

热爱科学
那你就换管新买的taq酶试试，最好是换对引物。估计引物不好
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scienceisnature
7楼2010-11-07 10:27:09
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
模板稀释一点，Mg2+多加一点。
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8楼2010-11-07 15:38:18
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吓猴蹲

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你说的情况太含糊，你具体想扩什么，我想如果引物没有问题，那么你的模板有没有问题，因为如果是P基因组很难说的，最好换个模板，如果是CDNA，那么我想引物你说没有问题，退火温度你确定没有问题过没，还有你可以试试换一管酶试试。不知道你的具体情况，不好分析
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一分一分，省到结婚
9楼2010-11-07 16:15:19
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heroyl

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果客官各方面都没问题那就是主观问题了！
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实验虐我千百遍，我待实验如初恋
10楼2010-11-07 18:24:14
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