24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1354  |  回复: 8

li1977li

金虫 (小有名气)

[求助] 测序信号不够?

T-A克隆一个1300bp的目的基因经蓝白斑筛选后挑单个白菌落摇菌后手工提质粒同时做菌落PCR,质粒酶切后和菌落PCR均阳性,吸20ul质粒送上海生工测序,今说信号不够,不知是什么意思?该怎办?求解!谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-10 08:39:40
送PCR产物去测序。。。
2楼2011-05-09 23:39:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cdl007

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-05-10 08:39:51
测序结果一般会发生您的质粒不够纯 或者浓度不够高

建议你把含质粒的菌平板划线法筛选单克隆菌株,再摇菌,提质粒,这样尽可能的获得较为纯的质粒
3楼2011-05-09 23:42:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主


dhd997(金币+1): 什么意思? 2011-05-10 08:40:08
测序公司测不出来的后,经常会有那么几个接口
千万不要因为走的太久,而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
4楼2011-05-09 23:45:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

li1977li

金虫 (小有名气)

谢谢楼上的解惑或建议,昨晚重摇菌今送菌液再送去测看看。
5楼2011-05-10 09:34:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-11 07:55:55
引用回帖:
Originally posted by li1977li at 2011-05-09 19:50:50:
T-A克隆一个1300bp的目的基因经蓝白斑筛选后挑单个白菌落摇菌后手工提质粒同时做菌落PCR,质粒酶切后和菌落PCR均阳性,吸20ul质粒送上海生工测序,今说信号不够,不知是什么意思?该怎办?求解!谢谢!

这个是他们的借口,应该是实验过程中出现了什么差错,有可能把样给混了或者弄丢了
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
6楼2011-05-10 10:06:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小皮球邓

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
li1977li(金币+1): 2011-05-10 14:09:24
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-11 07:56:14
我们一般测序都是拿菌去测序,公司自己提质粒测序。信号不好还有一种可能是你做PCR回收的时候出现了一些小问题。
坚持就是胜利!
7楼2011-05-10 12:34:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~!

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-11 07:56:27
公司一般是会扩增菌液的,信号不够可以多摇一会嘛,应该就是借口!
8楼2011-05-10 14:26:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-11 07:56:40
我们一般是自己提了质粒再送去测序的。
9楼2011-05-10 17:53:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 li1977li 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 297工科,求调剂? +6 河南农业大学-能 2026-04-12 6/300 2026-04-12 20:07 by bljnqdcc
[考研] 复试调剂 +14 积极向上; 2026-04-10 16/800 2026-04-12 20:02 by gruyclewee
[考研] 求调剂 +6 小聂爱学习 2026-04-11 9/450 2026-04-11 21:20 by 蓝云思雨
[考研] 086003调剂求助 +21 苏弋万 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 20:25 by dongdian1
[考研] 本人女孩 +7 吼吼, 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 284求调剂 +12 archer.. 2026-04-10 13/650 2026-04-11 08:44 by zhq0425
[考研] 080500求调剂 +17 黄宇博 2026-04-06 17/850 2026-04-11 08:36 by zhq0425
[考研] 284求调剂 +19 梵@@ 2026-04-06 21/1050 2026-04-10 21:12 by zhouxiaoyu
[考研] 22408 366分,本科211,一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +8 求上岸的小王 2026-04-10 8/400 2026-04-10 15:09 by hemengdong
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +22 土豆er? 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 10:58 by 高维春
[考研] 生物学求调剂 一志愿沪9,326分 +7 刘墨墨 2026-04-06 7/350 2026-04-10 08:11 by kangsm
[考研] 材料化工总分334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 20:19 by maddjdld
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 求调剂希望还是希望在山河四省附近 +3 快乐的小白鸽 2026-04-05 3/150 2026-04-09 17:36 by wp06
[考研] 308求调剂 +17 墨墨漠 2026-04-06 17/850 2026-04-09 09:25 by 壹往無前
[考研] 11408 325分 +3 jgtxuxgkx 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:10 by lbsjt
[考研] 333求调剂 +6 合乘杨习夕 2026-04-06 6/300 2026-04-07 09:44 by 猪会飞
信息提示
请填处理意见