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jack6335

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR

求出现图上拖带的原因!
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砖石王老三!!!
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zhyzx

金虫 (小有名气)

jack6335(金币+1):我是做RACE出现的这种情况! 2010-09-16 20:34:42
可能的原因比较多,比如你加的模板量有点多、PCR产物降解、引物的特异性不好等。
2楼2010-09-16 20:12:37
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Silencess

金虫 (小有名气)

jack6335(金币+1):我这是做的RACE,一次PCR后跑胶看不见条带,稀释10倍当模板做巢式PCR就是这种情况了。 2010-09-16 21:56:15
你这是跑的什么PCR,,是不是大概说一下。。。
繁花似錦,年華散盡。
3楼2010-09-16 21:00:18
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sfxt001

木虫 (小有名气)

jack6335(金币+5):谢谢啊,我要是早带你看到就好了! 2010-09-17 10:32:53
二次PCR模板量高了是主要的原因,还有一点,具我的经验我感觉你扩增出目的条带了,只不过拖个大尾巴你看不出来而已,估计你的这块胶已经扔了,如果没扔,把它放在清水里泡半个小时再看胶,可能会有惊喜哦!你这种情况我在做race的时候也遇到过。

[ Last edited by sfxt001 on 2010-9-16 at 23:54 ]
4楼2010-09-16 23:52:40
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pasture

金虫 (正式写手)

jack6335(金币+1):OK! 2010-09-17 10:33:07
模板稀释10倍,循环增加5个 试试
人一生只能年轻一次,这是人生最邪恶的地方
5楼2010-09-17 00:23:10
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laojiu9878

至尊木虫 (知名作家)

九牛

jack6335(金币+1):OK! 2010-09-17 10:33:21
模板太多,需狠狠稀释
但愿人长久
6楼2010-09-17 08:28:53
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dongfang12

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
哇,我的图和你的一样,请问后来你是怎么做出来的?
7楼2012-05-09 23:09:12
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jack6335

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2396967楼: Originally posted by dongfang12 at 2012-05-09 23:09:12:
哇,我的图和你的一样,请问后来你是怎么做出来的?

出来了,重新设计的引物,原来的不特异
砖石王老三!!!
8楼2012-05-10 10:46:22
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