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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR
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jack6335

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR

求出现图上拖带的原因！
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砖石王老三！！！
1楼 2010-09-16 19:25:54
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zhyzx

金虫 (小有名气)
jack6335(金币+1):我是做RACE出现的这种情况！ 2010-09-16 20:34:42
可能的原因比较多，比如你加的模板量有点多、PCR产物降解、引物的特异性不好等。
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2楼2010-09-16 20:12:37
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Silencess

金虫 (小有名气)
jack6335(金币+1):我这是做的RACE，一次PCR后跑胶看不见条带，稀释10倍当模板做巢式PCR就是这种情况了。 2010-09-16 21:56:15
你这是跑的什么PCR，，是不是大概说一下。。。
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繁花似錦，年華散盡。
3楼2010-09-16 21:00:18
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sfxt001

木虫 (小有名气)
jack6335(金币+5):谢谢啊，我要是早带你看到就好了！ 2010-09-17 10:32:53
二次PCR模板量高了是主要的原因，还有一点，具我的经验我感觉你扩增出目的条带了，只不过拖个大尾巴你看不出来而已，估计你的这块胶已经扔了，如果没扔，把它放在清水里泡半个小时再看胶，可能会有惊喜哦！你这种情况我在做race的时候也遇到过。

[ Last edited by sfxt001 on 2010-9-16 at 23:54 ]
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4楼2010-09-16 23:52:40
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pasture

金虫 (正式写手)
jack6335(金币+1):OK！ 2010-09-17 10:33:07
模板稀释10倍，循环增加5个 试试
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人一生只能年轻一次，这是人生最邪恶的地方
5楼2010-09-17 00:23:10
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laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛
jack6335(金币+1):OK! 2010-09-17 10:33:21
模板太多，需狠狠稀释
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但愿人长久
6楼2010-09-17 08:28:53
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dongfang12

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
哇，我的图和你的一样，请问后来你是怎么做出来的？
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7楼2012-05-09 23:09:12
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jack6335

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2396967楼: Originally posted by dongfang12 at 2012-05-09 23:09:12:
哇，我的图和你的一样，请问后来你是怎么做出来的？

出来了，重新设计的引物，原来的不特异
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砖石王老三！！！
8楼2012-05-10 10:46:22
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